血鎂濃度檢測試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
鎂是多種酶的激活劑,如磷酸酶、肌酸激酶、己糖激酶和羧化酶等。鎂也是組成DNA、RNA及核糖體大分子結構所必需的元素。鎂是維持正常神經和肌肉功能的重要元素。血清鎂濃度偏離正常值,與某些腎臟和內分泌疾病等相關。
測定原理:
鎂離子在堿性介質中氫氧化成膠體粒子,進一步與達旦黃結合后呈橘紅色,在一定范圍內,540nm吸光度與鎂離子濃度成正比。
自備儀器和用品:
可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體2mL×1管,4℃保存。
試劑二:液體2mL×1管,4℃保存。
試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。
標準液:液體1mL×1管,0.2 mmol/L鎂標準液,4℃保存。
測定操作:
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長到540 nm,蒸餾水調零。
2. 空白管:取EP管,加入120μL蒸餾水,20μL試劑一,混勻;進入20μL試劑二,混勻;加入40μL試劑三,混勻。靜置5min后于540nm測定吸光度,記為A空白管。
3. 標準管:取EP管,加入10μL標準液,110μL蒸餾水,20μL試劑一,混勻;進入20μL試劑二,混勻;加入40μL試劑三,混勻。靜置5min后于540 nm測定吸光度,記為A標準管。
4. 測定管:加入10μL血清,110μL蒸餾水,20μL試劑一,混勻;進入20μL試劑二,混勻;加入40μL試劑三,混勻。靜置5min后于540 nm測定吸光度,記為A測定管。
注意:空白管和標準管只需測定一次。
血鎂濃度計算:
血鎂含量(mmol/dL)= [C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]×V樣總
=0.02×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)
C標準液:0.2 mmol/L;V樣總:樣品總體積,1 dL=0.1 L。
注意事項:
1. 該試劑盒使用過程中,應盡量避免光照射;
2. 血液采取過程中,宜空腹采血,避免使用枸櫞酸鈉抗凝劑;
3. 紅細胞內鎂含量約為血清含量的3倍,應避免溶血,并及早將血清分離。
4. 加入試劑三混勻后應該在30 min內測定吸光度。
5. Z低檢出限為0.1mmol/L。
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