DNA/RNA提取試劑盒(吸附柱法)可以從多種樣本中提取DNA/RNA,包括血清、血漿、動物組織、體液等。處理的樣本通過加入裂解液后,把混合物移至吸附柱中,之后可以通過洗滌、洗脫,即可分離出病毒DNA/RNA。本試劑盒提取的核酸可以用于Real-time PCR,Northern Blot,Blotting Hybridization ,cDNA library Construction等實驗。
檢測方法:
一、樣本前處理
動物、植物組織:將樣本用生理鹽水或PBS緩沖液充分研磨,離心取上清后進行樣本提取操作。
血清、血漿、體液等樣本:直接進行樣本提取操作(不足200μL,可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補足200μL)。
二、樣本提取操作:
1.取200μL處理好的樣本(不足200μL,可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補足200μL),加入500μL裂解液,振蕩30秒,室溫靜止2分鐘。注:針對難裂解樣本,室溫靜置時間可延長至5分鐘。
2.把上述混合液轉移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液體時盡量不要吸到懸浮雜質,以免阻塞吸附膜),10000rpm離心1分鐘,棄去套管中液體。
3.向吸附柱中加入500μL去蛋白漂洗液,12000rpm離心30秒,棄去套管中液體。
4.向吸附柱中加入500μL洗滌液,12000rpm離心30秒,棄去套管中液體。
5.向吸附柱中加入500μL洗滌液,12000rpm離心30秒,棄去套管中液體。
6. 12000rpm再次離心2分鐘。
7.把吸附柱轉移至新的1.5mL滅菌離心管中,向吸附柱中加入 50μL洗脫液,并于室溫溫育2分鐘。
8.12000rpm離心1分鐘,棄去吸附柱,1.5mL滅菌離心管中液體即為DNA/RNA溶液。提取的DNA/RNA可直接用于各種下游應用試驗,如不立即使用,請于-80℃保存。
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