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蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒的試劑組成和配制

閱讀:923      發布時間:2023-6-30
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SP(EC2.4.1.7) 要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉移到果糖 木糖半乳糖和鼠李糖等,合成相應的葡萄糖基聚糖外,SP還能催化氫/醌合成熊果苷,具有美白效果,在化妝品工業中具有重要應用。
SP能夠以磷酸體,催化蔗糖產生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸酶催化6-磷酸葡萄糖,在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用還原NADP+生成NADPH,導340nm光吸收值增測定340nm吸光度增 速率,即可算SP活性。
試劑組成和配制:                                                               
提液液體100mL×1瓶,4℃保存                                                 
緩沖液液體10mL×1瓶,4℃保存                                                   
試劑一液體5mL×1瓶,4℃保存                                               
試劑二液體1.5mL×1支,4℃保存                                                 
試劑液體1mL×1支,4℃保存                                               
試劑四粉劑1支,-20℃避光保存,臨用前1mL蒸水溶解                           
試劑五粉劑1支,-20℃避光保存,臨用前1mL蒸水溶解                           
試劑粉劑1支,-20℃避光保存,臨用前2mL蒸水溶解                           
試劑七粉劑1支,-20℃避光保存,臨用前2mL蒸水溶解   
粗酶液提取:                                                                   
1、組按照組質g提液體(mL) 15~10的比例建議約0.1g組,入1mL提液進行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃,離心10min,清測
2、菌真菌按照胞數104個提液體mL500~10001的比例建議500萬胞入1mL提液,冰浴超聲波破碎胞率300w,超聲3,間隔7,總時間3min然后10000g,4℃,離心10min,清置于冰測       

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