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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 復蘇/凍存bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞

bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞
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參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 ATCC
  • 型號 復蘇/凍存
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海
屬性

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更新時間:2024-06-28 17:59:37瀏覽次數(shù):432評價

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貨號 YLK-XB0363h 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研
bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞The cells were transformed by infection with the NTKmT retrovirus vector that expresses polyomavirus middle T antigen

bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞


簡稱:bEnd.3


中文名:小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞


別名:bEND.3; b.End3; Bend.3; bEnd3; brain-derived Endothelial cells.3


種屬:小鼠


來源:腦微血管;內(nèi)皮細胞;BALB/c


培養(yǎng)條件:H-DMEM+10%FBS+1%雙抗


培養(yǎng)環(huán)境:空氣,95%; 二氧化碳 (CO2),5%


狀態(tài):懸浮


NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

18.png

細胞培養(yǎng)操作步驟:

1. 吸走多余培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞;

2. 吸干凈PBS后

加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;

(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài),導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞*漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;

4. 將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);

傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。


注意事項:不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


Cell cryopreservation

1.凍存液:92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實驗室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。

18-1.png

凍存方法:

1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存。



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