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目錄:優利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 復蘇/凍存B16-F0小鼠黑色素瘤細胞

B16-F0小鼠黑色素瘤細胞
  • B16-F0小鼠黑色素瘤細胞
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 ATCC
  • 型號 復蘇/凍存
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-07-09 08:39:09瀏覽次數:386評價

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供貨周期 現貨 規格 1×10?cells/T25培養瓶
貨號 YLK-XB0510h 應用領域 化工,生物產業
主要用途 科研 生長特性 貼壁
B16-F0小鼠黑色素瘤細胞培養環境 : 空氣,95% 。CO2,5% 37℃。

B16-F0小鼠黑色素瘤細胞


中文名稱 : 小鼠黑色素瘤細胞
細胞簡稱 : B 16-F0
細胞形態 : 上皮細胞樣
生長特性 : 貼壁細胞
培養環境 : 空氣,95% 。CO2,5% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎培養基+40% FBS+5% D M SO液氮
完培 : RPM I-1640(P M 150110)+10% F B S(164210-50)+1% P /S(P B 180120)


細胞培養操作步驟:

1. 吸走多余培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;

2. 吸干凈PBS后

加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰-酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;

(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞*漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

3. 加入6-8ml*培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;

4. 將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;

傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。


Cell cryopreservation

1.凍存液:92%*培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。


Tips
1. 細胞經過運輸后,部分細胞由于溫度變化及劇烈撞擊死亡破碎形成碎片,是正常現象。貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900-1000rpm(約150g)離心3min,棄上清。加5ml PBS重懸細胞,再900-1000rpm(約150g)離心3min,用新鮮的wan全培養基重懸接種到新的培養瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。
2. 細胞生長不均時,可以將細胞消化吹散后加入新的培養基重新接種或傳代。
3.細胞生長緩慢時,可以選擇提高血清濃度培養(最高不超過20%),也可以根據細胞生長狀態,選擇傳代細胞到新的培養瓶中繼續培養。
4. 不同細胞貼壁性差異比較大,所以消化時間差別較大,20s-10min均有可能,具體以細胞消化到相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準,嚴禁消化到細胞wan全漂浮。客戶消化過度導致細胞死亡、漂浮、生長緩慢,不提供免費售后服務。
5. 干冰發貨均為兩支,客戶先復蘇一支,若復蘇失敗及時聯系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶同時復蘇兩支均狀態不佳,我方不提供免費售后服務。
6. 細胞狀態正常時,應盡快凍存細胞保種,凍存后應隨機抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶凍存細胞導致死亡負責,客戶凍存細胞死亡不提供免費售后服務。


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