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SHP-77 人小細胞肺癌細胞（STR鑒定）

簡介：

SHP-77 保留了SCLC的重要特征，具有穩定的生物化學特性，可以連續培養。該細胞系是小細胞肺癌中一種不常見的未分化大細胞突變體。它雖然具有突變體的形態，但保持了經典SCLC的生化特性。電子顯微鏡觀察發現存在腺體形成和胞漿內板層體(intracytoplasmic lamellar bodies)。這些細胞表達神經內分泌標記物L-多巴脫羧酶和致密核心分泌顆粒(dense core secretory granules)。

SHP-77可用做檢測51Cr和111In釋放對體外細胞及裸鼠體內毒性的靶標，用于評估肺癌患者的細胞和血清的免疫反應水平。該細胞可用于評估接受放射或化學療法治療的SCLC患者的免疫狀況。經本庫STR檢測無誤。

細胞特性：

1） 來源：54歲 男性 肺; 小細胞肺癌

2） 形態：懸浮和松散貼壁

3） 含量：>1x10^6  細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5） 用途：僅供科研使用。

運輸和保存：

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的注意事項：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完培6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完培來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。

培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640培養基                87%

優質胎牛血清                                 10%

GlutaMAX-1谷氨/酰胺                              1%

Sodium Pyruvate丙酮酸鈉                       1%

P/S青霉/素-鏈霉/素                            1%
注意: 該細胞參考傳代周期：4-6天,參考換液頻率：每2-3天換1次液,傳代時可以輕輕拍打細胞培養瓶側面十余次，將懸浮的細胞進行收集離心，以40萬~50萬/ mL的密度重懸傳代。輕輕拍打后顯微鏡下觀察仍貼壁未懸浮的細胞量多的話可以繼續拍打重復收集，細胞量很少的則丟棄，不收集傳代。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完培重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完培的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

SHP-77 人小細胞肺癌細胞（STR鑒定）

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