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豬凝血因子13(F13)試劑盒
  • 豬凝血因子13(F13)試劑盒
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貨物所在地:上海上海市

地: 國產(chǎn)

更新時間:2024-11-17 10:53:46

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豬凝血因子13(F13)試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本中凝血因子13(F13)含量。檢測范圍:0.6ng/ml - 22ng/ml

豬凝血因子13(F13)試劑盒


本試劑盒僅供研究使用。

使用目的:

本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本中凝血因子13(F13)含量


實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本凝血因子13(F13)水平。用純化的凝血因子13(F13)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入凝血因子13(F13)再與HRP標記的凝血因子13(F13)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的凝血因子13(F13)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品凝血因子13(F13)濃度。


試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標試劑

6ml×1

8

標準品(40ng/ml

0.5ml×1

3

標包被

12孔×8

9

標準品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


試劑盒12.jpg



操作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

20ng/ml

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

10ng/ml

4號標準品

150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

5ng/ml

3號標準品

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

2.5ng/ml

2號標準品

150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1.25ng/ml

1號標準品

150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘  

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外

7. 溫育:操作同3

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。


保存條件及有效期

1試劑盒保存:2-8

2.有效期:6個月


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