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AO-EB 雙染試劑盒
規格:100ml/500ml
保存:4℃避光密封保存,有效期一年。
產品簡介:
吖啶橙能透過胞膜完整的細胞,嵌入細胞核 DNA,與雙鏈 DNA 結合后發出綠色熒光,溴化乙錠
(EB)僅能透過胞膜受損的細胞,嵌入核 DNA,發橘紅色熒光。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察,可見四種細胞形態:活細胞(VN),核染色質著綠色并呈正常結構;早期凋亡細胞(VA),核染色質著綠色呈固縮狀或圓珠狀;晚期凋亡細胞(NVA),核染色質為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀;非凋亡的死亡細胞(NVN),核染色質著橘紅色并呈正常結構。本產品 AO、EB 溶液濃度分別為 100ug/ml,所含穩定劑不影響實驗效果。
使用方法:(僅供參考)
使用前先根據用量,將 AO 溶液和 EB 溶液按 1:1 混合成工作液,現用現配。
對于貼壁細胞或爬片,去掉培養基,用 PBS 洗兩遍去除殘余培養基和未貼壁細胞,加入新的 PBS; 如果需要觀察全部細胞特性,保留未貼壁細胞,可以直接在培養基中加入工作液。按照每毫升培養基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后,用 PBS 洗 2 次,除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養基于熒光顯微鏡下觀察即可。
對于懸浮細胞,可直接加入工作液或離心收集細胞后在 PBS 中加入工作液。按照每毫升培養基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后,離心去除工作液,后用 PBS 洗 2 次,除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養基于熒光顯微鏡下觀察即可。
建議用藍光激發,視野下可以觀察到死細胞呈現紅色,活細胞呈現綠色。
注意事項:
含酚紅培養基對觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養基。
染色液工作濃度和染色時間可根據具體實驗情況適當調整,以期達到最佳效果。
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