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MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
規格:500T/1000T
保存:MTT 溶液-20℃保存;Formazan 溶解液室溫或-20℃保存。
產品內容:
成分 | 500T | 1000T |
MTT 溶液 | 5mL | 5mL×2 |
Formazan 溶解液 | 60mL | 60mL×2 |
產品簡介:
MTT 可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物 formazan,在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解,然后通過酶標儀可以測定 490nm 波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快, 則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。
使用說明:
1. 收集對數期細胞,調整細胞懸液濃度,分于 96 孔板,每孔 180μL,3000-10000 個細胞/孔。
2. 置 37℃、5%CO2 溫箱培養使細胞貼壁,培養 6-24 小時。
3. 加入適當濃度的受試化合物,繼續培養適當時間。
4. 小心吸去上清,加入 90μL 新鮮培養液,再加入 10μL MTT 溶液,繼續培養 4 h。
5. 然后吸掉上清,每孔加入 110μL Formazan 溶解液,置搖床上低速振蕩 10 min,使結晶物充分溶解。在酶聯免疫檢測儀 490 nm 處測量各孔的吸光值。
6. 同時設置調零孔(培養基、MTT、 Formazan 溶解液),對照孔(細胞、相同濃度的藥物溶解介質、培養液、MTT、 Formazan 溶解液),每組設定 3 復孔。
注意事項:
1. 由于使用 96 孔板進行檢測,如果細胞培養時間較長,一定要注意蒸發的問題。一方面,由于
96 孔板周圍一圈最容易蒸發,可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養液;另一方面,
可以把 96 孔板置于靠近培養箱內水源的地方,以緩解蒸發。
2. MTT 溶液為黃色需避光保存,長時間光照會導致失效。當顏色變為灰綠色時,請勿使用。
Formazan 溶解液結凍或產生沉淀時可以 37℃水浴孵育以促進溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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