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RNAwait(非凍型組織 RNA 保存液)
規格:100ml
保存:室溫保存,有效期兩年。
產品說明:
RNAwait 是一種無毒的可直接使用的樣品儲存液,能使細胞內的 RNA 與 RNA 酶分離,可以快速可靠地保存動物組織、細胞內的 RNA。組織獲取后立即浸入 RNAwait 保存液中,在室溫可以保存 7 天,4℃可以保存 4 周,-20℃、-80℃標本可以長期保存,RNA 穩定存在不降解,取出后用各類方法抽提可以獲得高質量的 RNA。
操作流程:
1. 根據要保存的各樣本的體積,計算出所需 RNAwait 用量。RNAwait 的用量應當是組織體積的 10
倍(如 100mg 組織約用 1ml RNAwait);離心收集 2×106 細胞 RNAwait 的用量是 1ml。
2. 將 RNAwait 按需要量分裝入自備保存管中;
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm 的任意片狀,立即*浸入 RNAwait 中。組織的厚度一定要
<0.5 cm。組織過厚則 RNAwait 不能有效滲入,組織中間部位的 RNA 不能受到保護。較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入 RNAwait。
4. 保存時先將樣本浸入RNAwait 后置 4℃冰箱過夜(4℃過夜是必需的,這樣可使 RNAwait *滲入到組織中),然后轉移到-20℃冰箱(RNAwait 在-20℃時仍為液態,有結晶析出,是正常情況);或者在 4℃冰箱過夜后,從 RNAwait 中取出組織塊,轉移到-80℃冰箱。在 RNAwait 中保存的標本, 反復凍融至室溫 20 次不影響 RNA 的質量。
注意事項:
1. 組織和細胞取材速度要快,在獲取后應當盡快浸入 RNAwait,以防止 RNA 降解。
2. 冰凍組織不能用 RNAwait 保存,因為 RNAwait 不能有效滲入冰凍組織。
3. 保存樣品的 RNA 提取:樣本從-20℃或-80℃冰箱取出后,復蘇到室溫后,取出組織塊,再用于提取 RNA。細胞樣本則復溫后低速離心收集細胞,去除 RNAwait,再用于提取 RNA。后繼的處理(如組織勻漿)可以在室溫下進行,不必在液氮中操作,RNA 仍能有效得到保護。殘留少量 RNAwait保存液不影響后繼提取 RNA 的質量。
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