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通用名    ：病毒RNA提取試劑盒（吸附柱法）

Name      ：Virus RNA Extraction Kit（Adsorption column method）

【產(chǎn)品介紹】

本試劑盒可以從多種樣本中提取RNA，包括血清、血漿、動(dòng)物組織、體液等。處理的樣本通過(guò)加入裂解液后，把混合物移至吸附柱中，之后可以通過(guò)洗滌、洗脫，即可分離出病毒RNA。

本試劑盒提取的RNA可以用于Real-time PCR，Northern Blot，Blotting Hybridization ，cDNA library Construction等實(shí)驗(yàn)。

【技術(shù)信息】

【試劑組成】

【試劑規(guī)格】50T/盒。

【儲(chǔ)存運(yùn)輸】

  室溫保存，有效期12個(gè)月。可室溫下運(yùn)輸。

【自備材料】

 滅菌的1.5mL離心管、各種規(guī)格滅菌的槍頭、離心機(jī)（最大轉(zhuǎn)速≥14000rpm）、無(wú)水乙醇、漩渦混合器等。

【檢測(cè)方法】

一、樣本前處理

動(dòng)物、植物組織：將樣本用生理鹽水或PBS緩沖液充分研磨，離心取上清后進(jìn)行樣本提取操作。

血清、血漿、體液等樣本：直接進(jìn)行樣本提取操作（不足200μL，可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補(bǔ)足200μL）。

二、樣本提取操作

1.取200μL處理好的樣本（不足200μL，可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補(bǔ)足200μL），加入500μL裂解液，振蕩30秒，室溫靜止2分鐘。

2.把上清液轉(zhuǎn)移到吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液體時(shí)盡量不要吸到懸浮雜質(zhì)，以免阻塞吸附膜），12000rpm離心1分鐘，棄去套管中液體。

3.（可選）向吸附柱中加入500μL去蛋白漂洗液，12000rpm離心30秒，棄去套管中液體。

4.向吸附柱中加入500μL 洗滌液，12000rpm離心30秒，棄去套管中液體。

5.向吸附柱中加入500μL 洗滌液，12000rpm離心2分鐘，棄去套管中液體。

6.把吸附柱轉(zhuǎn)移至新的1.5mL滅菌離心管中，室溫晾干1分鐘。

7.向吸附柱吸附膜的中央加入50μL洗脫液，室溫下靜置2分鐘。

8.12000rpm離心1分鐘，棄去吸附柱，1.5mL滅菌離心管中液體即為RNA溶液。

【注意事項(xiàng)】

1.如果有冷凍離心機(jī)，最好在4℃進(jìn)行離心。

2.請(qǐng)穿戴手套，用DEPC水浸泡所有的槍頭和離心管以保證不含有RNA酶，如果條件允許，請(qǐng)?jiān)诔瑑艄ぷ髋_(tái)進(jìn)行。

3.使用前請(qǐng)檢查裂解液中是否有結(jié)晶，如果由于溫度過(guò)低導(dǎo)致溶液結(jié)晶，請(qǐng)將裂解液置于56℃溫浴，使結(jié)晶*溶解后再使用。

4.去蛋白漂洗液、洗滌液請(qǐng)按照說(shuō)明書加入無(wú)水乙醇。

5.RNA請(qǐng)于4℃保存或者冰浴，立即用于下游實(shí)驗(yàn)，或者立即置于-80℃冰箱保存。