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Polysciences PEI轉染試劑配制說明書

閱讀:5376      發布時間:2023-5-16
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聚乙烯亞胺(PEI)是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳個原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿"(proton sponge)體。PEI,可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉染試劑(分子量25000)被證明為轉染效率zui hao的PEI轉染試劑,下面就以PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉染試劑(貨號:23966-1/23966-100)為例來說明Polysciences PEI轉染試劑的配制過程。

一、產品特性


CAS No
9002-98-6, 26913-06-4分子式(CH2CH2NH)n
熔點
73-75o外觀
白色或黃色固體
溶解性

溶于熱水,低 pH 值的冷水,甲醇和乙醇;

不溶于:苯,乙mi和丙酮

儲存
室溫


二、溶液配制

材料:1g PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉染試劑(23966-1)、1L 純水、12 M鹽酸、10M氫氧化鈉、一次性 0.1-0.2µm PES 真空無菌過濾器、無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。

器材:1 L 玻璃燒杯、1 L 玻璃量筒、核準 pH 計、2 支 1 mL 塑料移液管、托盤、聚四氟乙烯(PTFE)攪拌棒、真空泵配制過程: 

  1. 取1g PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉染試劑(23966-1)溶于900ml水中;

  2. 加熱到60-80℃并攪拌;

  3. 加入HCl,調節PH 2.0;

  4. 蓋上燒杯,攪拌3h,直到PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉染試劑(23966-1)粉末wan全溶解為止;

  5. 冷卻,直至室溫;

  6. 再加入NaOH ,調節pH 6.9-7.1;

  7. 將調節好的溶液移到量筒中,加水至1L;

  8. 真空過濾消毒;

  9. 將消毒好的溶液進行分裝,分裝好的溶液在-20°C下 保存。

備注:加熱/加酸都有利于 PEI 溶解。加酸的時候注意用量,多次少量,達到PEI wan全溶解即可。 

試劑儲存:冷凍部分溶液可在-20°C 保存長達一年;部分解凍的溶液可在 4°C 保存2 周,注意不可反復凍融。

粉末儲存:未開封的粉末有效期兩年。可在室溫下保存直至使用。

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