免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)是基于抗原抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色來對組織內抗原進行定位、定性、定量的一項技術。那么你知道免疫組化實驗的分類與應用嗎?讓我們一起來看看吧!
一、分類
根據抗體標記物的不同一般分為免疫酶標法、免疫熒光法、親和組織化學法、免疫鐵蛋白法、免疫金法、放射免疫自影法。下面介紹兩種較為常用的兩種技術:
(1)免疫熒光法
免疫熒光法是最早建立的免疫組織學技術。將已知抗體標上熒光素,以此作為探針,檢查細胞或組織內的相應抗原。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后會發出一定波長的熒光,從而對組織中的抗原進行定位或定量。
(2)免疫酶標法
免疫酶標法是繼免疫熒光之后發展的應用較為廣泛的免疫組化技術。先以酶標記的抗體作用于組織或細胞,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性物質或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對其進行定位,從而對細胞內抗原進行定位或定性研究的一種方法。
二、應用
IHC的原理是通過化學反應使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內抗原,對其進行定位、定性及定量的研究。人體內很多器官和組織內的組成細胞,由于起源一致,在形態結構上非常相似,很多時候是很難靠形態來區分。在過去沒有免疫組化的情況下,識別有很強的主觀性,錯誤難以避免。免疫組化就像細胞的“血型"鑒定,靠它可以明確組織來源。由于免疫組化具有特異性強、靈敏度高、定位準確等特點,且能將形態研究與功能研究有機結合在一起,所以這門新技術已被廣泛應用于生物學和醫學研究的許多領域。免疫組化在病理學診斷中的應用主要包括:
(1)確定細胞類型
(2)辨認細胞產物
(3)了解分化程度
(4)鑒定病變性質
(5)探討腫瘤起源或分化表型
(6)確定腫瘤分期等
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