DMEM培養(yǎng)基是一種常用的細胞培養(yǎng)基,用于支持多種哺乳動物細胞的生長和增殖。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的制作工藝是什么嗎?讓我們一起來看看吧!
1. 準備所需材料:DMEM培養(yǎng)基粉末、無菌去離子水、無菌濾器、無菌容器、pH計、稱量儀器、試劑瓶等。
2. 消毒操作區(qū)域:將工作臺、培養(yǎng)器具、儀器等進行消毒處理,確保無菌條件。
3. 稱量DMEM粉末:根據(jù)所需培養(yǎng)基的濃度和容量,稱取適量的DMEM粉末。
4. 加入無菌去離子水:將DMEM粉末緩慢加入無菌容器中的無菌去離子水,同時攪拌均勻,直到wan全溶解。
5. 調整pH值:使用pH計測量培養(yǎng)基的pH值,如果不在理想范圍內(通常為7.2-7.4),則通過添加少量無菌的NaOH或HCl來調整pH值。
6. 滅菌:將調整好pH值的DMEM培養(yǎng)基進行高壓滅菌處理,確保無菌性。
7. 分裝和保存:將滅菌的DMEM培養(yǎng)基分裝到無菌試劑瓶中,封閉好,存放在4℃冰箱中保存。
注意事項:
1. 在制備過程中,需要嚴格遵守無菌操作規(guī)范,以避免細菌和其他微生物的污染。
2. 所使用的水、容器、儀器等都必須經過嚴格的消毒處理,以確保培養(yǎng)基的無菌性。
3. 在稱取DMEM粉末時,應注意避免粉塵飛揚,以免對操作人員的健康造成危害。
4. 調整pH值時,應小心操作,避免酸堿溶液濺到皮膚或眼睛,如有意外發(fā)生,應立即用大量清水沖洗相應部位。
5. 制備好的DMEM培養(yǎng)基應盡快分裝和保存,避免長時間暴露在環(huán)境中,以免細菌和其他污染物進入培養(yǎng)基中影響其質量。
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