限制性內切酶(restriction endonuclease,REases)是一種能夠識別雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列,并在特定位置切割DNA鏈中的磷酸二酯鍵的一類酶,簡稱限制酶。下面讓我們一起來看看NEB限制性內切酶AlwI(R0513S)的產品介紹吧!
NEB限制性內切酶AlwI是一種可識別GGATCNNNN^N_ 序列的限制性內切酶,來源于大腸桿菌菌株,攜帶有克隆自洛菲不動桿菌(Acinetobacter lwoffii)(R. Morgan)的 AlwI 基因。NEB酶AlwI 切割產生的 DNA 片段含有單堿基突出的 5′ 末端,它比平末端更難連接。該酶對dcm甲基化和CpG甲基化不敏感,dam 甲基化阻斷該酶酶切。對于不能熱失活的酶,NEB建議進行柱純化,或脂糖凝膠電泳后切膠回收,或酚/氯仿抽提。
優化限制性核酸內切酶反應:
在建立限制性核酸內切酶消化物時,需要考慮幾個關鍵因素。在正確的反應體積中使用適量的DNA、酶和緩沖液組分,可以達到最佳消化效果。根據定義,1 單位的限制性內切酶將在 60 分鐘內在 50 μl 反應中wan全消化 1 μg 底物 DNA。這種酶:DNA:反應體積比可用作設計反應的指南。然而,大多數研究人員遵循列出的“典型"反應條件,建議過度消化 5-10 倍,以克服 DNA 來源、數量和純度的可變性。
產品選購:
貨號 | 產品名稱 | 規格 |
R0513S | SAlwI | 500 units |
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