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12% 一步法AB液蛋白快速制膠試劑盒
貨號：P0125
存儲條件：APS，-30~-15℃保存，≤0℃運輸，可在2~8℃保存至少3個月；其他組分，2~8℃保存。
產品簡介：
12% AB液蛋白快速制膠試劑盒適用于蛋白聚丙烯酰胺凝膠的快速制備。本試劑盒采用上層膠和下層膠的預混配方，只需將試劑兩兩混合，加入促凝劑即可凝膠，簡便快捷。所配的上層膠帶有顏色，方便點樣和區分不同凝膠。試劑盒提供的改良型促凝劑APS，具有良好的穩定性和促凝效果，配膠過程中無需添加TEMED。本試劑盒可配制125塊mini PAGE膠(以 0.75 mm厚度膠計算)。
產品組分
組 分 | 貨號 | P0105 |
上層膠 A液 | P0125-1 | 80 ml |
上層膠 B液 | P0125-2 | 80 ml |
下層膠 A液(12%) | P0125-3 | 250 ml |
下層膠 B液 | P0125-4 | 250 ml |
APS | P0125-5 | 8 ml |
凝膠濃度選擇參照
貨號 | 試劑盒濃度 | 蛋白最佳分離范圍 |
P0065 | 6% | 50-150KD |
P0085 | 8% | 30-130KD |
P0105 | 10% | 20-100KD |
P0125 | 12% | 10-70KD |
P0155 | 15% | 10-55KD |
操作流程：
以制備一塊0.75/1.0/1.5 mm的PAGE膠為例。
下層膠配方
凝膠厚度 | 下層膠 A液 | 下層膠 B液 | APS |
0.75mm | 2.0ml | 2.0ml | 40ul |
1.0mm | 2.7ml | 2.7ml | 60ul |
1.5mm | 4.0ml | 4.0ml | 80ul |
上層膠配方
凝膠厚度 | 上層膠 A液 | 上層膠 B液 | APS |
0.75mm | 0.5ml | 0.5ml | 10ul |
1.0mm | 0.75ml | 0.75ml | 15ul |
1.5mm | 1.0ml | 1.0ml | 20ul |
1. 各組分在使用前請顛倒混勻6-8次。
2. 下層膠配制：取等體積下層膠A液和下層膠B液，各2.0/2.7/4.0 ml，混勻。
3. 上層膠配制：取等體積上層膠A液和上層膠B液，各0.5/0.75/1.0 ml，混勻。
4. 向步驟2的混合溶液中加入40/60/80 μl的APS，立即充分混勻，然后注入制膠玻璃板中，使液面距短玻璃板上沿約1.5cm。
注1：此溶液一般過量，請勿全部注入。
注2：混勻操作避免劇烈振蕩，在灌注的過程中避免將氣泡灌入制膠玻璃板中。
注3：灌注下層膠后用ddH2O或醇封閉，待下層膠凝固后再灌注上層膠。
5. 向步驟3的混合溶液中加入10/15/20μl的APS，立即充分混勻，無需等待下層膠凝固，即可將混勻后的溶液輕緩注入制膠玻璃板中，輕輕插入梳齒。
注：灌注上層膠溶液可沿著長玻璃板輕緩注入，避免將下層膠沖散。
6. 待膠凝固后(室溫約20-30 min)，拔去梳齒即可用于電泳。
注：請盡量使用新鮮配制的電泳緩沖液。
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