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深圳市艾瑞斯儀器有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 食品,農業 |
|---|
產品介紹
甲硝唑ELISA檢測試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測組織、蜂蜜等樣本中的甲硝唑（Metronidazole，MNZ），試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的甲硝唑和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗甲硝唑抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含甲硝唑含量成負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中甲硝唑的殘留量。
甲硝唑ELISA檢測試劑盒技術指標
2.1 試劑盒靈敏度：1.5ppb(ng/ml)
2.2 反應模式：25℃ 30min～30min～15min
2.3 檢測下限：
組織（雞肉、鴨肉、肝臟、魚、蝦等）………1.5ppb
蜂蜜、牛奶………………………………………1.5ppb
雞蛋 ………………………………………………3ppb
2.4 交叉反應率：
與類似物的交叉反應率：
甲硝唑(MNZ) ………………………………………100%
二甲硝咪唑DMZ……………………………………68%
2.5 樣本回收率：
魚/蝦/禽/肝臟…………………………………90±10%
蜂蜜、牛奶、雞蛋……………………………90±10%
3 試劑盒組成
酶標板……………………………96孔
標準液（黑蓋）：各1ml
0ppb、1.5ppb、3.0ppb、6.0ppb、12.0ppb、24.0ppb
高標準液：100ppb……………………1ml
抗體工作液 (藍蓋) ………………………………5.5ml
酶標記物 (紅蓋) …………………………………11ml
底物液A (白蓋)……………………………………6ml
底物液B(黑蓋) ……………………………………6ml
終止液(黃蓋) ………………………………………6ml
20×濃縮洗滌液(白蓋)……………………………40 ml
2×濃縮復溶液(黃蓋) ……………………………50 ml
說明書………………………………………………1份
酶聯免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
1 編 號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應：加標準品或樣本100µl/孔到各自的微孔中，然后加抗體工作液50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光反應30分鐘。
3 洗 滌：將孔內液體甩干，用工作洗滌液350µl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，最后用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
4 加酶反應：加酶標記物100µl/孔，25℃避光反應30分鐘。
5 洗 滌：同上
6 顯 色：加底物液A 50µl/孔，再加底物液B 50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘（若藍色過淺，可適當延長反應時間）。
7 終 止：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，終止反應。
8 測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應在終止反應后10分鐘內完成。
結果分析
1 百分吸光率的計算
標準液或樣本的百分吸光率等于標準液或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以第一個標準液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即
百分吸光度值（%）＝A×100%
A0
A—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標準溶液的平均吸光度值
2 標準曲線的繪制與計算
以標準液百分吸光率為縱坐標，對應的標準液濃度（ppb）的對數為橫坐標，繪制標準液的半對數曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中，從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度，乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中待測物的實際濃度。
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