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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 食品,農業 |
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豬口蹄疫病毒vp1結構蛋白抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Foot and Mouth Disease Virus O(ELISA)
【包裝規格】96T×1/盒、96T×2/盒
【預期用途】口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,其特征為口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發生水泡和爛斑。
【原 理】
豬口蹄疫病毒vp1結構蛋白抗體檢測試劑盒由預包被口蹄疫病毒O型VP1抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬口蹄疫病毒O型抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有豬口蹄疫病毒O型抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有口蹄疫病毒O型抗體。
【試劑盒組成】
序號 名稱 規格(96T×1) 規格(96T×2)
1. 酶標板 96T×1 96T×2
2. 酶標記物 (紅蓋) 11ml×1 11ml×2
3. 樣品稀釋液(黃蓋) 50ml×1 50ml×1
4. 20X濃縮洗滌液 40ml×1 40ml×1
5. 底物液A (白蓋) 6ml×1 11ml×1
6. 底物液B (黑蓋) 6ml×1 11ml×1
7. 終止液 (黃蓋) 6ml×1 11ml×1
8. 陽性對照 (紅蓋) 1.0 ml×1 1.5 ml×1
9. 陰性對照 (綠蓋) 1.0 ml×1 1.5 ml×1
10. 蓋板膜 1張 2張
11. 自封袋 1個 1個
12. 說明書 1份 1份
13. 稀釋板 1塊 2塊
【儲存及有效期】于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃(推薦水浴)避光反應30分鐘。
5.甩去孔內液體,每孔加350μl工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶標記物100μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值。
【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照的平均OD值即ODNC應≤0.3,陽性對照的平均OD值即ODPC應≥0.6。