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- 艾瑞斯 品牌
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- 深圳市 所在地
訪問次數(shù):126更新時(shí)間:2023-06-10 09:35:12
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【產(chǎn)品名稱】
通用名:豬口蹄疫病毒A型抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Foot and Mouth Disease Virus A (ELISA)
【包裝規(guī)格】 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
【預(yù)期用途】 口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,F(xiàn)MDV)引起的偶蹄動(dòng)物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,其特征為口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發(fā)生水泡和爛斑。
豬口蹄疫病毒A型抗體檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)豬血清中口蹄疫病毒A型抗體,可用于口蹄疫病毒A型疫苗免疫效果評(píng)價(jià)。
【原 理】
本試劑盒由預(yù)包被口蹄疫病毒A型抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)豬血清、血漿樣本中豬口蹄疫病毒A型抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬口蹄疫病毒A型抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加TMB底物液,與酶標(biāo)結(jié)合物反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有口蹄疫病毒A型抗體。
【試劑盒組成】
序號(hào)名稱規(guī)格/96T×1規(guī)格/96T×2規(guī)格/96T×5
1酶標(biāo)記物11ml×1(紅蓋)11ml×2(紅蓋)26ml×2(紅蓋)
2樣品稀釋液50ml×1(黃蓋)50ml×1(黃蓋)200ml×1(黃蓋)
320X濃縮洗滌液40ml×1(白蓋)40ml×1(白蓋)200ml×1(白蓋)
4底物液A6ml×1(白蓋)11ml×1(白蓋)26ml×1(白蓋)
5底物液B6ml×1(黑蓋)11ml×1(棕蓋)26ml×1(黑蓋)
6終止液6ml×1(黃蓋)11ml×1(黃蓋)26ml×1(黃蓋)
7陽性對(duì)照1.0 ml×1(紅蓋)1.5 ml×1(紅蓋)2.0 ml×1(紅蓋)
8陰性對(duì)照1.0 ml×1(綠蓋)1.5 ml×1(綠蓋)2.0 ml×1(綠蓋)
9酶標(biāo)板96T×196T×296T×5
10蓋板膜125
11自封袋112
12說明書111
13稀釋板125
【儲(chǔ)存及有效期】 2~8℃保存,有效期12個(gè)月。
包被板開封后請(qǐng)于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個(gè)月。
【適用儀器】 含450nm、630nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。
【樣品準(zhǔn)備】
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長(zhǎng)期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對(duì)照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。
【檢驗(yàn)方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)陰性/陽性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰、陽性對(duì)照孔分別加入陰、陽性對(duì)照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃(推薦水浴)避光反應(yīng)30分鐘。
5.甩去孔內(nèi)液體,每孔加350ul工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值。
【參考值】 實(shí)驗(yàn)正常的情況下,陰性對(duì)照的平均OD值即ODNC應(yīng)≤0.3,陽性對(duì)照的平均OD值即ODPC應(yīng)≥0.6。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1.樣品的OD值即ODS;
2.閾值計(jì)算:SP值=(ODS-ODNC)/(ODPC-ODNC);
SP值≥0.2,結(jié)果判定為陽性;SP值<0.2,結(jié)果判定為陰性。
3.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)表明豬只抗體水平不足,建議補(bǔ)打相應(yīng)疫苗。
【試驗(yàn)方法的局限性】
該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)豬血清、血漿中豬口蹄疫病毒A型抗體,根據(jù)A值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評(píng)估。
【注意事項(xiàng)】
1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不