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一、豬弓形蟲抗體檢測試劑盒
通用名:豬弓形蟲IgG抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine Toxoplasma(ELISA)
二、包裝規格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
三、預期用途 豬弓形蟲病是由弓形蟲(Toxoplasma,TOX)引起的一種原蟲病,又稱弓形體病。弓形蟲病是一種人畜共患病,宿主的種類十分廣泛,人和動物的感染率都很高。
豬弓形蟲抗體檢測試劑盒用于檢測豬血清或血漿中弓形蟲特異性抗體,評估豬場弓形蟲感染狀況。
四、試劑盒原理
豬弓形蟲抗體試劑盒系由預包被弓形蟲(TOX)重組抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中弓形蟲抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有弓形蟲抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有弓形蟲抗體。
五、豬弓形蟲抗體檢測試劑盒組成
酶標板、酶標記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對照、陰性對照
六、儲存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入樣品稀釋液90μl,再加入稀釋后的血清10μl。
注:樣本稀釋比例相當于1:100。
4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃(推薦水浴)避光反應30分鐘。
5.甩去孔內液體,每孔加350μl工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶標記物100μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照≤0.2,陽性對照≥0.6。
【檢驗結果的解釋】
1.C.O(臨界值)=2.1×陰性對照均值(陰性對照均值小于0.1時按0.1計算);
2.樣品A值>C.O為陽性,樣品A值≤C.O為陰性。