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一、禽流感病毒抗體檢測卡原理
禽流感是由正粘病毒科A型流感病毒屬的特定病毒引起的。A型流感病毒根據其血凝素與神經氨酸酶抗原性的不同又可分為許多不同的亞型。
采用競爭法來定性地檢測禽類血清中的禽流感抗體,對于不同亞型的禽流感病毒抗體都有很好的敏感性。在檢測卡的樣品墊中預先包埋有禽流感抗原,血清中的相應抗體先與樣品墊包埋的抗原反應,從而抑制了其與檢測線(T線)上抗體的反應,使得檢測線不顯示紅色線條。反之,樣品墊上的抗原隨液體向上流動,與膠體金偶聯抗體和檢測線抗體形成復合物,使得檢測線顯示紅色線條。
二、禽流感病毒抗體檢測卡組成
1.檢測卡 50個
2.緩沖液 1瓶
3.說明書 1份
三、適用范圍:禽流感抗體檢測卡適用于養殖場或者檢測機構檢測不同亞型的禽流感病毒抗體。
四、儲存及有效期
保存于干燥陰涼處(2-30℃),保質期24個月。
【試驗方法】
1.撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
2.用配套吸管吸取已準備好的樣本,垂直而緩慢的滴加1滴(約25ul)到加樣孔內(注意,過量加入樣本或緩沖液會出現錯誤結果)。
3.等待10分鐘后用裝有緩沖液的滴瓶滴加兩滴(約60ul)緩沖液到加樣孔。
4.室溫下放置10-15分鐘判斷結果,超過30分鐘的結果無效。
【結果判斷】
1.陰性:在觀察孔內,檢測線區(T)及對照線區(C)同時出現紫紅色線。意味著抗體水平低于HI滴度1:16。
2.陽性:在觀察孔內,只有對照線區(C)出現一條紫紅色線。意味著抗體水平等于或高于HI滴度1:32。
3.無效:在觀察孔內,對照線區(C)不出現色線。
本試劑盒的檢測閾值是HI試驗1:32。所以通過對被檢血清進行倍比稀釋,找到其呈現陽性的最大稀釋倍數,則可以得出抗體滴度。例如:將待檢血清用生理鹽水分別做1:2(一份血清加一份生理鹽水,往后依次類推)、1:4、1:8稀釋,然后將3份不同稀釋倍數樣本分別進行檢測,如1:2、1:4都呈陽性,而1:8呈陰性,則呈現陽性的最大稀釋倍數為1:4,那么此份樣本的最終抗體滴度為25(1:32)乘以22(1:4)等于27(1:128)。