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一、禽流感病毒H7亞型抗體快速檢測卡原理
禽流感H7亞型抗體檢測卡采用競爭性膠體金免疫層析試驗(GICA)原理制成,對于H7亞型的禽流感病毒抗體有很好的敏感性。樣本加入到加樣孔后與AIV抗原、膠體金標記物一起沿層析膜移動,若樣本中存在AIV-H7抗體則與膠體金標記物競爭AIV抗原,使檢測線不顯示紫紅色,若樣本中不存在AIV-H7抗體則產生顏色反應。
二、禽流感病毒H7亞型抗體快速檢測卡試劑組成
1.禽流感H7亞型抗體檢測卡 50個
2.樣品稀釋液 1瓶
三、適用范圍:適用于禽流感H7亞型抗體檢測。
四、儲存及有效期
保存于干燥陰涼處(2-30℃),保質期24個月。
【試驗方法】
1.撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
2.用配套吸管吸取已準備好的樣本,垂直而緩慢的滴加1滴(約25ul)到加樣孔內(此時觀察孔內沒有液體流出)。
3.等待10分鐘后用裝有緩沖液的滴瓶滴加兩滴(約60ul)緩沖液到加樣孔。
4.室溫下放置10-15分鐘判斷結果,超過30分鐘的結果無效。
注意,過量加入樣本或緩沖液會出現錯誤結果。
【結果判斷】
1.陰性:在觀察孔內,檢測線區(T)及對照線區(C)同時出現紫紅色線。意味著抗體水平低于HI滴度1:16。
2.陽性:在觀察孔內,只有對照線區(C)出現一條紫紅色線。意味著抗體水平等于或高于HI滴度1:32。
3.無效:在觀察孔內,對照線區(C)不出現色線。
本試劑盒的檢測閾值是HI試驗1:32。所以通過對被檢血清進行倍比稀釋,找到其呈現陽性的最大稀釋倍數,則可以得出抗體滴度。例如:將待檢血清用生理鹽水分別做1:2(一份血清加一份生理鹽水,往后依次類推)、1:4、1:8稀釋,然后將3份不同稀釋倍數樣本分別進行檢測,如1:2、1:4都呈陽性,而1:8呈陰性,則呈現陽性的最大稀釋倍數為1:4,那么此份樣本的最終抗體滴度為25(1:32)乘以22(1:4)等于27(1:128)。
【試驗結果的解釋】
對于免疫后的樣本,抗體水平的高低反映了免疫效果的高低。對于未經免疫的樣本,陽性結果表明可能有AIV-H7感染,需結合臨床及其他方法進行分析。