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UNC1999

MCE 國(guó)際站：UNC1999

品牌：MedChemExpress (MCE)

CAS：1431612-23-5

純度：0.9983

貨號(hào)：HY-15646

存儲(chǔ)條件：粉末 -20°C 3 年 4°C 2 年 溶劑中 -80°C 2 年 -20°C 1 年

運(yùn)輸條件：美國(guó)大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產(chǎn)品活性：UNC1999 是一種有效，選擇性和SAM-競(jìng)爭(zhēng)性的 EZH2 和 EZH1 抑制劑，IC50 分別為

體外：UNC1999 是第一種口服生物可利用抑制劑，對(duì)野生型和突變型 EZH2 以及 EZH1 具有較高的體外效力，EZH1 是一種密切相關(guān)的 H3K27 甲基轉(zhuǎn)移酶，在各自的催化域中與 EZH2 具有 96% 的序列同一性。UNC1999 在廣泛的表觀遺傳和非表觀遺傳靶標(biāo)上對(duì) EZH2 和 EZH1 具有高度選擇性，與輔因子 SAM 競(jìng)爭(zhēng)，與肽底物不競(jìng)爭(zhēng)。UNC1999 對(duì) sigma1、sigma2、組胺 H3 和 NET 的 Ki 值分別為 4,700 nM、65 nM、300 nM 和 1,500 nM。NC1999 選擇性殺死 DB 細(xì)胞，這是一種具有 EZH2 Y641N 突變的 DLBCL 細(xì)胞系。 UNC1999 顯示出濃度和時(shí)間依賴性的 DB 細(xì)胞增殖抑制 (EC50=633±101 nM (n=3))[1]。MCE 尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

體內(nèi)：單次腹膜內(nèi) (IP) 注射 15、50 或 150 mg/kg 的 UNC1999 可達(dá)到較高的 Cmax (9,700-11,800 nM)，并且在雄性瑞士白化小鼠中表現(xiàn)出劑量線性。150 和 50 mg/kg IP 劑量均導(dǎo)致 UNC1999 的血漿濃度在整個(gè) 24 小時(shí)內(nèi)高于其細(xì)胞 IC50，而 15 mg/kg IP 劑量導(dǎo)致 UNC1999 的血漿濃度高于其細(xì)胞 IC50 約 12 小時(shí)。我們接下來(lái)檢查了 UNC1999 是否具有口服生物利用度，并很高興地發(fā)現(xiàn)單次 50 mg/kg 口服劑量的 UNC1999 在雄性瑞士白化小鼠中達(dá)到較高的 Cmax (4,700 nM) 和良好的暴露水平。單次口服給藥后，UNC1999 的血漿濃度維持在細(xì)胞 IC50 以上約 20 小時(shí)。值得注意的是，所有劑量（包括 150 mg/kg IP 劑量）均對(duì)所有測(cè)試小鼠耐受性良好，未觀察到任何不良反應(yīng)[1]。MCE 尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：小鼠[1] Sai Life Sciences 使用瑞士雄性白化小鼠進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn) PK 研究。評(píng)估了四種劑量（15、50 和 150 mg/kg IP 和 50 mg/kg PO）的 UNC1999。每項(xiàng)研究持續(xù) 24 小時(shí)。在八個(gè)時(shí)間點(diǎn)（給藥后 0.08、0.25、0.5、1、2、4、8 和 24 小時(shí)）報(bào)告的 UNC1999 血漿濃度是 3 只測(cè)試動(dòng)物的平均值。MCE 尚未獨(dú)立確認(rèn)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：DB 細(xì)胞是一種含有 EZH2 Y641N 突變的彌漫性大 B 細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系，來(lái)自 ATCC，在補(bǔ)充有 10% 胎牛血清、抗生素和不同濃度的 UNC1999（0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1、2、3 和 5 μM）或 UNC2400 和 DMSO 對(duì)照的 RPMI 1640 中培養(yǎng)。含有測(cè)試化合物或?qū)φ盏呐囵B(yǎng)基每三天更新一次。使用 TC20 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器系統(tǒng)測(cè)量至少三個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)中的活細(xì)胞數(shù)量。使用酸性提取方案從細(xì)胞核中制備總組蛋白。使用 15% 的 SDS-PAGE 分離約 1 微克的總組蛋白，轉(zhuǎn)移到 PVDF 膜上，并用組蛋白抗體探測(cè)。本研究中使用的抗體為抗EZH2、通用H3和H3K27me3[1]的抗體。MCE尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。僅供參考。

激酶實(shí)驗(yàn)：EZH2 Y641N 突變體由 BPS Bioscience 生成和分析。用 HMT 分析緩沖液中的 10% DMSO 制備一系列 UNC1999 稀釋液，并將 5 μL 稀釋液添加到 50 μL 反應(yīng)中，以使 DMSO 的最終濃度在所有反應(yīng)中均為 1%。所有酶促反應(yīng)均在室溫下以重復(fù)方式進(jìn)行，在含有 HMT 分析緩沖液、S-腺苷甲硫氨酸、酶和 UNC1999 的 50 μL 混合物中分別進(jìn)行 60 分鐘（EZH2）和 180 分鐘（EZH2 Y641N）。這些 50 μL 反應(yīng)在 HMT 底物預(yù)包被板的孔中進(jìn)行。酶促反應(yīng)后，棄去反應(yīng)混合物，用 TBST 緩沖液將每個(gè)孔洗滌三次，并用封閉緩沖液緩慢搖動(dòng) 10 分鐘。清空孔，加入100 μL稀釋的1°抗體。然后在室溫下緩慢搖動(dòng)板60分鐘。與前面一樣，清空板并洗滌三次，并在室溫下與封閉緩沖液一起搖動(dòng)10分鐘。棄去封閉緩沖液后，加入100 μL稀釋的2°抗體。然后在室溫下緩慢搖動(dòng)板30分鐘。與前面一樣，清空板并洗滌三次，并在室溫下與封閉緩沖液一起搖動(dòng)10分鐘。棄去封閉緩沖液，新鮮制備HRP化學(xué)發(fā)光底物混合物。向每個(gè)空孔中加入100 μL該混合物。立即在BioTek SynergyTM 2微孔板讀數(shù)儀中測(cè)量樣品的發(fā)光[1]。MCE尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

IC50 & Target：EZH2 EZH1

銷(xiāo)售產(chǎn)品：Eravacycline (dihydrochloride)  | Methicillin (sodium salt)  | Ginkgolic Acid  | Guselkumab  | SCH-23390 (hydrochloride)  | Belumosudil  | Colcemid  | AU-15330  | Tetracycline  | DMH-1

Trending products：Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds  |  Oligonucleotides

參考文獻(xiàn)：

[1]. Konze KD, et al. An Orally Bioavailable Chemical Probe of the Lysine Methyltransferases EZH2 and EZH1. ACS Chem Biol. 2013;8(6):1324-34.