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核酸分析儀校準規范
1、核酸分析儀校準的范圍
本規范適用于基于凝膠電泳原理對核酸片段的長度和濃度進行分析的核酸分析儀的校準.適用的核酸片段的長度范圍為(100-1 000) bp,對于超出此片段長度范圍的核 酸分析儀的校準,可參照本規范執行。本規范不適用于平板電泳儀和遺傳分析儀的 校準。
2、引用文件
本規范引用了下列文件:
JJF 1265—2010生物計量術語及定義
凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本規范,凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規范。
3、術語和計量單位
3. 1 片段長度 fragment length
表示核酸片段的大小,以核昔酸數目(nt)或堿基對數目(bp)為單位。
3. 2 堿基對 (bp) base pair
核酸中兩條鏈間的配對堿基。如腺環吟-胸腺噺嚏(A-T)對、腺噱吟-尿嚥嚏(A- U)、鳥嗦吟-胞嗜嚏(G-C)對、鳥嚟吟-尿嗟嚏(G-U)對等。堿基對數目是表征DNA 或雙鏈RNA的長度。
[JJF 1265—2010, 4.41] 4概述
核酸分析儀(以下簡稱分析儀)是基于凝膠電泳技術原理.將不同大小的雙鏈核酸片段進行分離,在熒光染料存在的條件下,熒光染料嵌入雙鏈核酸中發出熒光,對熒光信號進行檢測分析的儀器,可根據各核酸片段的電泳時間和熒光信號值進行定性、定量 分析。分析儀通常由進樣器、毛細管/微芯片、熒光檢測光學部件、微電路控制部件、計算機及應用軟件組成,可用于單個和多重PCR片段、限制性內切酶消化的DNA等片段長度和濃度的分析。
5、計量特性
5.1示偵誤差
片段長度示值誤差和片段濃度示值誤差。
5.2重復性
片段長度重復性和片段濃度重復性。
5.3片段濃度線性