Sulfo-Cy3 maleimide，水溶CY3-馬來酰亞胺

結構式：

磺化Cy3是Cy3(Cyanine 3)的水溶型。它的光譜性質和Cy3類似，在熒光顯微鏡下發(fā)橘黃色熒光。它的熒光很亮，并且對pH不敏感，一般可以用530nm-561nm的激光束激發(fā)然后用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察，所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。標記后，樣品背景熒光一般認為比TAMRA等系列的染料低。 磺化Cy3可以用來標記蛋白，抗體，多肽，核酸等各種生物分子。

馬來酰亞胺(maleimide)是生物標記反應中常用的基團，它可以和巰基(-SH)通過親和加成反應生成穩(wěn)定的巰醚(thioester)結構從而實現(xiàn)標記。盡管胺基(比如賴氨酸精氨酸側鏈)也有親和性，但在中性或微酸性緩沖液中，馬來酰亞胺選擇性標記巰基(反應速度比胺基快>1000倍)。標記反應反應迅速，選擇性高，產率好，另外，巰基是一種在生物分子中廣泛存在的官能團，比如蛋白中的半胱氨酸(cysteine)和雙硫鍵等，因此馬來酰亞胺/巰基(maleimide/thiol)標記已成為僅次于NHS/胺基標記的常用生物連接反應(bioconjugation)。

磺化Cy3-馬來酰亞胺的水溶性*高，所以在標記反應中不需要使用有機共溶劑，特別適合標記對有機溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性*好，并且染料分子本身帶電荷，標記到生物分子表面后不會引發(fā)疏水性聚集，提高熒光標記產物的穩(wěn)定性。磺化Cy3-馬來酰亞胺也溶于甲醇，DMSO，DMF等有機溶劑，標記反應也可以在純有機溶劑中進行

磺化Cy3-馬來酰亞胺標記后的產物Ex/Em是550/566nm。

注意事項

· 磺化Cy3水溶性高，*性強，如需脂溶性標記染料，請選擇普通Cy3-馬來酰亞胺。

· 天然生物分子中巰基一般于氧化狀態(tài)(如雙硫鍵)存在，在馬來酰亞胺標記前，務還原劑(如DTT，TCEP)活化巰基并除去多余還原劑。

· 馬來酰亞胺也可以和疊氮化合物反應，應避免疊氮官能團。

· 標記反應不要放在強光下，因為大部分熒光化合物在強光下長時間照射會緩慢光漂泊(photobleaching)。

熒光光譜：

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