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瓊脂糖微球的制備方法和應(yīng)用
瓊脂糖微球是一種廣泛應(yīng)用于生物科學(xué)領(lǐng)域的惰性載體,具有良好的生物相容性和親水性,且分子上富含羥基。下面將詳細(xì)介紹瓊脂糖微球的制備方法、應(yīng)用以及相關(guān)特性。
瓊脂糖微球的制備方法
瓊脂糖微球的制備涉及到多個(gè)步驟,包括制備瓊脂糖微球、制備分散相、乳化和固化成球等。以下是具體的制備步驟:
制備瓊脂糖微球:將瓊脂糖溶解在加熱的水中,攪拌均勻。加熱時(shí)間的長(zhǎng)短會(huì)影響微球的粒徑和分散系數(shù)。如果加熱時(shí)間過(guò)短,瓊脂糖并未全部溶解,可能會(huì)形成較大顆粒;如果加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng),瓊脂糖可能會(huì)發(fā)生一定程度的水解,分子量下降,這有利于在分散相中形成較為均勻的微球,但會(huì)對(duì)手工操作帶來(lái)困難。
制備分散相:將Span80溶解在有機(jī)溶劑中,加熱到80℃。
乳化:將瓊脂糖溶液導(dǎo)入分散相,不斷攪拌,乳化20min左右。乳化劑用量不足或過(guò)多都會(huì)影響微球的形態(tài)和均勻性。
固化成球:逐漸降低溫度,降低到室溫后瓊脂糖微球基本就成型了。加入去離子水并靜置2小時(shí)以上,對(duì)微球進(jìn)行洗滌去除有機(jī)相,得到未交聯(lián)的瓊脂糖微球。
進(jìn)行交聯(lián):微球可以在堿性條件下與交聯(lián)劑反應(yīng),常用的交聯(lián)劑有環(huán)氧氯丙烷等短鏈交聯(lián)劑、丙二醇縮水甘油醚等長(zhǎng)鏈交聯(lián)劑。交聯(lián)時(shí)間的長(zhǎng)短會(huì)影響瓊脂糖微球的孔隙率和機(jī)械性能。
瓊脂糖微球的應(yīng)用
瓊脂糖微球作為一種惰性載體,廣泛應(yīng)用于生物大分子的分離純化中。其優(yōu)點(diǎn)包括多孔性、親水性、不含帶電基團(tuán)以及多糖鏈上的羥基在一定的條件下可以偶聯(lián)上不同的配基等。此外,通過(guò)適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)修飾,瓊脂糖微球可以成為具有特殊功能的磁性瓊脂糖微球,用于偶聯(lián)或分離純化不同的物質(zhì)。
瓊脂糖微球的特性
瓊脂糖微球具有以下特性:
良好的生物相容性和親水性:這使得瓊脂糖微球在生物大分子的分離純化中發(fā)揮了重要作用。
表面惰性,非特異性吸附低:瓊脂糖微球的表面惰性使其在生物大分子分離純化中具有較低的非特異性吸附,這對(duì)于提高純化效率非常重要。
容量大,具有開放性的支撐骨架:瓊脂糖微球的開放性支撐骨架使其具有較大的容量,適合于大規(guī)模的生物大分子分離純化。
機(jī)械性能和力學(xué)性能較差:雖然瓊脂糖微球的機(jī)械性能相對(duì)較差,但在許多生物科學(xué)應(yīng)用中,這并不是一個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題。
溶脹程度會(huì)隨溶劑性質(zhì)變化:瓊脂糖微球的溶脹程度會(huì)受到溶劑性質(zhì)的影響,這可能會(huì)影響到其在特定應(yīng)用中的性能。
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