目錄:上海晨曄生物科技有限公司>>技術服務>> 肝切除模型
產地類別 | 國產 | 應用領域 | 綜合 |
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肝部分切除基本以30%、50%、70%和90%肝切除為主,根據肝葉比例進行相應切除,但右上葉和右下葉同屬一個功能單位,兩者有一段融合共用的脈管系統,單獨切除其中一部分容易損傷殘留肝葉脈管系統的通暢性。肝切除對肝再生的刺激強度與所切除肝臟的質量有直接的關系,切除量大于85%或小于30%均可導致再生緩慢。
構建小鼠 70%肝臟切除模型
實驗動物選擇:
小鼠肝臟分葉結構明顯并都有相對獨立的肝靜脈系統和Glisson系統,各肝葉比重相對固定,便于進行不同比例肝部分切除,且其膽囊解剖更接近人類。且小鼠大部分肝切除模型是當前研究肝臟再生的最佳模型,可用于模擬肝臟再生的起始、增殖和終止階段。
肝切除模型造模方法:
(一)用2%異氟的烷氣體麻醉小鼠。
(二)腹部消毒后,取劍突下腹部正中豎切口,長度 1.5cm-3cm,開腹時注意不要損傷腹腔器官組織,依次切開表皮、肌層及腹膜,找到肝臟,用鑷子拉開并固定兩側腹肌,充分暴露肝臟。
(三)用眼科剪游離與肝臟相關的韌帶,先后結扎肝中葉及左外側葉并切除,注意保留膽囊;結扎時要靠近肝葉基底,盡量減少肝葉的殘留和對血管的損傷,結扎時動作要輕柔,避免撕扯到肝下的血管。
但值得注意的是,結扎中葉時線結的位置不能太靠近肝上的腔靜脈,否則會導致靜脈閉塞或狹窄,阻礙殘留的右葉和尾葉的血液回流,從而導致肝組織的壞死和再生的失敗。因此,線結的位置應該超過膽囊,但與上腔靜脈的距離應不小于2mm。
(四)回納剩余肝組織及腹內容物,依次縫合關腹,縫合后再次消毒切口。術后禁食禁水6h。皮下注射5%葡萄糖的注射液替代術中蒸發損失,出血和液體移位中的液體損失,并作營養用,放置于37℃溫箱復溫6h。
(五)以手術結束為0h,根據分組時間點要求分別于術后24h、72h、7d將動物處死,稱量并記錄各組再生肝臟的重量,取樣。肝組織收集后迅速-80℃低溫冰箱保存。
構建肝臟缺血再灌注損傷模型
實驗動物選擇
缺血再灌注損傷實驗模型多選用大鼠等嚙齒類動物來建立。相對與大小鼠而言,小鼠具有飼養成本低、空間利用率高、藥劑消耗量小、操作同步性好等優點。
動物品系:Balb/c小鼠,雄性,周齡為6-8w
造模方法
1、 術前12h禁食,自由飲水。
2、 腹腔注射麻醉,麻醉成功后將小鼠平躺在手術的臺上膠帶固定四肢,將小鼠腹部術去毛,用碘酒和75%乙醇術區消毒。
3、 取腹正中切口1cm,打開腹腔,小心分離出肝臟供血的門靜脈和肝動脈。
4、 用無創血管的夾夾閉門靜脈和肝動脈,0.5min后,肉眼可見阻斷葉明顯變白,說明阻斷成功,用止血的鉗夾閉皮膚切口臨時關閉腹腔,將小鼠放恒溫加熱毯上保溫。
5、 完成持續缺血60min后,重新打開腹腔,迅速取出血管的夾,恢復缺血肝血流,0.5min左右可見缺血區肝臟由白色逐漸恢復為鮮紅色表明再灌注成功,逐層縫合腹腔肌肉和皮膚關閉腹腔,完成手術。待小鼠清醒后放回飼養室飼養,密切關注小鼠的狀態及生存狀況并做好記錄。