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離心機在血型選取上的應用

來源:長沙湘智離心機儀器有限公司   2017年07月20日 13:18  

輸血時如血型不合會造成患者出現輸血的不良反應,因此使用相符的血型是輸血安全的前提保證。而作為人類的重要遺傳標志-血型,在近年科學的發展下,人們逐步探索分析,已發現300余種現人類紅細胞血型抗原。當今,世界多國正努力建立稀有血型細胞血庫,當中對所發現的稀有血型,如Rh、MNSs、P、Kell、Kidd、Lutheran等,建立起稀有血型系統,以保證為稀有血型的患者更加快速及時地提供合適紅細胞。

 

中國稀有血型篩選與建庫

在我們的臨床研究中,對于稀有血型的篩選工作和具體項目中,對于引發臨床不良輸血反應的稀有血型抗原或是表型組合是zui值得關注的,而事實證明這些稀有抗原或是表型組合往往存在于如Vel、Lan、Jk(a-b-)、Lu(a-b-)、Rhnull、OH等這些高頻率血型抗原組以及多個血型系統中,與此同時我們也對如Fy(a-b+)、Di(a+b-)等能引起輸血反應和新生兒溶血病的血型抗原的中國人*的免疫反應而進行的篩選,并希望建立起符合我國國情的稀有血型庫。以此來解決我國臨床上的稀有血型不足、不良輸血反應的發生等問題來提高我國的輸血療效。
 

尿素溶血試驗

Jk(a-b-)表型的篩選:因稀有血型本身所具有特殊性,充分利用其特點設計出將其篩選出的方法,Kidd血型系統中Jk(a-b-),此種紅細胞可在2M的尿素溶液中使其紅細胞膜在6h以上的時間內保持完整性。而Jka和Jkb抗原的紅細胞在2M尿素溶液中*溶血的時間不超過30s。其操作過程為:選取RSP加樣器設備將標本紅細胞稀釋到1%的懸液中,并在96孔微量板上加20ul懸液,再將100ul2mol/L尿素溶液加入其中,放置離心機中以800r/min轉速離心3min,溶血為陽性,不溶血為陰性,如為陰性者則進一步對血細胞做分子生物學分析。本次通過Jk(a-b-)尿素篩選實驗,獲得8名Jk(a-b-)表型獻血者。

試管法

將選取標本紅細胞稀釋為2-5%懸液,標記試管(抗-Mur、-Lub、-Rhmull、-Kell、-MN、-H)并加入相應抗血清和標本紅細胞各50ul。采用直接離心法或間接抗球蛋白法,輕搖觀察結果;發生凝集為陽性,反之為陰性,共發現稀·臨床研究·有血型7例。

在我們對稀有血型篩選過程中,有4種稀有血型是采用篩選稀有等位基因的方法。通過采用PCR的定點誘變技術,我們成功構建出含有突變SNP位點的s和Oka血型等位基因的標準質粒,制備出稀有血型等位基因突變點片段,應用在對照分子生物學方法篩選稀有血型。組建多個多重PCR體系,檢測等位基因。

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