磷酸清洗　　通常用于從系統(tǒng)中除去有機雜質(zhì)。可能是由于洗滌作用，它似乎比強有機溶劑更好也更快。這一步清洗必須在硝酸鈍化之前完成。硝酸鈍化　　實際上是作用于不銹鋼表面，在表面上生成均勻的氧化層。這層氧化膜保護不銹鋼免受腐蝕（鹵化物，螯合劑，等等）并且盡量減少浸出的金屬離子進入流動相。以下應(yīng)用需要在使用前做磷酸清洗和硝酸鈍化包括：?所有的氨基酸分析系統(tǒng)　　?所有包含電化學(xué)檢測器的系統(tǒng)　　?所有要分析無機陽離子，包括過渡金屬的系統(tǒng)　　?所有利用柱后添加衍生試劑或絡(luò)合樣品組分的系統(tǒng)以下應(yīng)用需要在使用前只做磷酸清洗包括：　　?所有常規(guī)用途的、可能在低pH環(huán)境下在低紫外檢測波長下運行的HPLC系統(tǒng)　　?所有需要高靈敏度性能的梯度紫外檢測系統(tǒng)系統(tǒng)清洗指南注意：在實行這個程序時采用適當?shù)陌踩雷o措施準備工作：　　首先，摘下色譜柱，用兩通或接頭取代色譜柱。在實行這一清洗步驟時，如果有可能選擇監(jiān)測的紫外波長為：254nm。通過軟件或移去電纜的方式取消紫外檢測器的自動回零功能。具體步驟：　　1、用甲醇*沖洗系統(tǒng)，以等比例方式通過泵的所有管路。　　2、用水*沖洗系統(tǒng)，以等比例方式通過泵的所有管路。　　3、以等比例方式通過泵的所有管路導(dǎo)入～30%v/v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大約一個小時。在沖洗期間活動所有的閥，包括：參比閥、進樣閥及旁路閥等等。　　4、用水*沖洗所有管路和系統(tǒng)。　　必要時用6N硝酸（HN03）重復(fù)以上步驟。否則，跳到第7步。注意：硝酸是一個強紫外吸收溶液。除非需要，不要做鈍化程序　　5、以等比例方式通過泵的所有管路導(dǎo)人6N硝酸水溶液（大約是40%）。以1mL/min流速洗大約一個小時。　　6、用水*沖洗系統(tǒng)，仔細檢查是否有任何滲漏，在沖洗期間反復(fù)活動所有的閥，包括：參比閥、進樣閥及旁路閥等等。　　注意：如果你要用低于270nm的紫外波長作檢測，則需要更大量水的清洗過程，不斷的換新鮮水并活動各個閥（沖洗進樣器，等）以便從系統(tǒng)中除去所有的痕量硝酸根離子。硝酸清洗后經(jīng)常在幾天之內(nèi)都會觀察到在低紫外波長下有負的基線漂移。勤換水和有耐心是盡快消除紫外本底的關(guān)鍵。　　7、返回到甲醇洗，然后繼續(xù)用實驗所需的溶劑沖洗。　　8、通過軟件或接上電纜的方式重新使紫外檢測器的自動回零功能恢復(fù)。