許多相顯示有鍵合相的流失,當基線穩定性受到影響時,這可以在梯度條件下被清晰地觀察到。
盡管大多數超純C18相可以預期產生低柱流失,但是需要謹慎選擇替代選擇性的鍵合相,以確保在低UV波長或LC/MS下進行分析時柱流失不會引起不可預見的問題。
需要注意的是,色譜柱的流失取決于許多因素,并且可能會隨時間和系統而變化。
因此,在比較色譜柱流失時,必須在受控條件下進行。
本實例對超純ACE C18色譜柱(頂部)的低流失特性與PFP色譜柱(中間)的高流失特性進行了比較。
ACE C18-PFP色譜柱(底部)顯示其流失水平與ACE C18相當,盡管后者包含可以提供替代選擇性的完整PFP官能團。
UV流失的比較
在相同條件下對更寬范圍的色譜柱的進一步分析證實,刢先的高純度C18柱品牌顯示出相似的低水平色譜柱流失。
然而,傳統上推薦改變選擇性的替代鍵合相(即苯基,極性嵌入式,PFP表面化學物質)的評估顯示,所有這些非C18色譜柱均有顯著更高的流失。
ACE C18-PFP將低流失水平(典型的刢先C18色譜柱品牌)與替代選擇性相結合,從而為分析者提供了有價值的方法開發工具。
當采用MS檢測時,非C18相給分析者帶來了傳統上使用所出現的額外挑戰。
在情況下,柱流失可能會污染檢測器信號并掩蓋重要分析物。
在以下實例中,在梯度運行的8-10分鐘時段中監測柱流失,此時有機物的百分比增加至其大水平,因此柱流失也是高的。
MS Spectra(左邊系列)提供了在該8-10分鐘窗口中檢測到流失的m/z裂解,而總離子色譜圖(右邊系列)闡明了在相同8-10分鐘時間段內所獲得的流失結果。
通過LC/MS分析,極性嵌入式色譜柱的TIC追蹤和MS光譜(之前通過UV檢測顯示有顯著流失)再次顯示柱流失水平較高。
來自空白運行(在沒有連接色譜柱的情況下開展)的MS光譜可以使背景系統流失量化。
ACE C18-PFP色譜柱和刢先的C18色譜柱均顯示與空白運行相似的流失水平,這表明正在發生的柱流失可以忽略。
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