產(chǎn)品簡介: EDTA 是一種相對較好的螯合脫鈣劑,對組織結構影響小,可以較好的保存組織的某 些酶類,經(jīng) EDTA 脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢, 一般脫需要數(shù)周至數(shù)月
保存條件: 2~8°C 保存。
操作流程: 1、骨組織脫鈣時,取材不易過厚,一般大約 5mm;
2、組織固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min;
3、組織用蒸餾水洗清洗 3 次,每次 20min;
4、組織轉移至 20~30 倍體積的 EDTA 脫鈣液中,脫鈣 10~30 天或更長時間。如果想加快 脫鈣速度,可以置于 37°C 進行脫鈣。如果必要,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣,多數(shù)組 織脫鈣 2 周~3 個月即可,每周更換一次,直至終點;
5、用蒸餾水沖洗數(shù)次;
6、常規(guī)脫水、包埋。
注意事項: 1、 厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣 10~30 天即可。
2、 適當加溫能加快脫鈣的速度,一般不應超過 37~40°C,溫度過高容易使骨組織造成松 散解體,尤其不可大于 60°C。
3、脫鈣應*,防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應控制在不影響組織切片的同時盡量縮短 脫鈣時間,以免脫鈣過長引起組織損害。
4、 脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。
5、 骨組織脫鈣應先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行,不應先脫鈣后固定,以便減少組織的 損傷程度。
6、 每隔一段時間檢測一次脫鈣程度,避免脫鈣過度,脫鈣過度會增加組織的損傷程度,影 響染色結果。
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。