日前來(lái)自美國(guó)佐治亞州奧古斯塔大學(xué)Augusta University的多位科學(xué)家利用PerkinElmer的SAR-CoV-2檢測(cè)方案對(duì)來(lái)多個(gè)自醫(yī)療機(jī)構(gòu)和社區(qū)收集到的429份對(duì)應(yīng)的鼻咽拭子和唾液樣品進(jìn)行檢測(cè)，以分析唾液樣品、鼻咽拭子的檢測(cè)效果，以及利用唾液樣品檢測(cè)優(yōu)化方案后的檢測(cè)效果。

樣本處理和SARAS-CoV-2分析工作流程示意圖概述：對(duì)在醫(yī)療機(jī)構(gòu)和社中采集的對(duì)應(yīng)鼻咽拭子和唾液樣本進(jìn)行測(cè)試和驗(yàn)證。1、U方案：使用U方案對(duì)鼻炎拭子或唾液樣本進(jìn)行SARS-CoV-2檢測(cè)流程（唾液樣品不經(jīng)過(guò)均質(zhì)，直接用于RNA提取）；2、SalivaAll方案：使用SalivaAll方案對(duì)唾液樣本進(jìn)行核酸檢測(cè)流程（在唾液樣品提取RNA之前利用珠磨機(jī)均質(zhì)器進(jìn)行唾液均質(zhì)化步驟）；3、SalivaAll混樣方案：唾液樣本均質(zhì)后按5:1進(jìn)行混樣，然后進(jìn)行RNA提取、RT-PCR檢測(cè)。

U方案通過(guò)RT-PCR檢測(cè)240個(gè)對(duì)應(yīng)的鼻咽拭子和唾液樣本的SARS-CoV-2。結(jié)果顯示 28.3%（68/240）的樣本從唾液、鼻咽拭子或兩者中檢測(cè)出SARS-CoV-2陽(yáng)性。唾液中的檢出率50.0%（34/68）低于鼻咽拭子的檢出率89.7%（61/68）。

SalivaAll方案對(duì)189個(gè)對(duì)應(yīng)的鼻咽拭子和唾液樣本進(jìn)行了檢測(cè)，在提取RNA之前利用BeadBoost珠磨均質(zhì)器對(duì)唾液樣品進(jìn)行樣本均質(zhì)化步驟，然后進(jìn)行核酸提取、RT-PCR。結(jié)果顯示，50.2%（95/189）的樣本從唾液、鼻咽拭子或兩者中檢測(cè)出SARS-CoV-2陽(yáng)性。唾液中SARS-CoV-2的檢出率97.8%（93/95）高于鼻咽拭子檢出率78.9%（75/95）。

U方案與SalivaAll方案比較：對(duì)U方案檢測(cè)的85份唾液樣本用SalivaAll方案再次進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)兩種方案進(jìn)行評(píng)估。在兩種方案評(píng)估的85份唾液樣本中，57.6%（49份）的SARS-CoV-2檢測(cè)呈陽(yáng)性，在U方案、SalivaAll方案或兩者皆有。唾液樣品SalivaAll方案的檢出率為100%（49/49），而U方案的檢出率為36.7%（18/49）。

SalivaAll混樣方案根據(jù)FDA5:1的混樣建議，分別利用1個(gè)陽(yáng)性樣品和4個(gè)陰性樣品混成陽(yáng)性混樣，利用5個(gè)陰性樣品混成陰性混樣。陽(yáng)性混樣和陰性混樣各混20個(gè)樣品。利用SalivaAll混樣方案，唾液樣本均質(zhì)后每個(gè)樣品取60ul進(jìn)行混樣，5個(gè)樣品總體積為300ul混樣，然后進(jìn)行RNA提取、RT-PCR檢測(cè)。結(jié)果顯示，20個(gè)陽(yáng)性混樣的檢測(cè)準(zhǔn)確性為95%，陰性混樣的檢測(cè)準(zhǔn)確性為100%。

研究表明傳統(tǒng)的SARS-CoV-2核酸檢測(cè)流程在唾液樣本的操作和檢測(cè)靈敏度等方面具有一定的挑戰(zhàn)。通過(guò)PerkinElmer優(yōu)化的唾液樣品檢測(cè)方案，在RNA提取之前加上唾液樣品均質(zhì)處理步驟，檢測(cè)結(jié)果靈敏性大幅提升，檢測(cè)靈敏度高于鼻咽拭子，同時(shí)可以對(duì)唾液樣品進(jìn)行混樣檢測(cè)。