宮頸癌是常見的女性惡化腫瘤,其發生率在女性群體中僅次于乳腺癌。世衛組織統計顯示,2020年全球宮頸癌新發病例超過60.4萬例,其中近11萬例在中國。目前關于宮頸癌發生機制尚未*明確,主要與人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染有關,其中HPV16、18、31、45型是宮頸癌的高危型。
為了對抗這一癌癥,人類研發出了HPV疫苗。HPV疫苗分為治療性疫苗和預防性疫苗,目前國家所提倡接種的HPV疫苗是預防性疫苗,主要使用基因工程技術進行生產,通過誘導特異性中和抗體,阻斷病毒的早期感染來預防病毒相關疾病的發生。
當我們在接種HPV疫苗時,能看見疫苗包裝盒上有“釀酒酵母”的字眼。
釀酒酵母是什么?難道HPV疫苗的制作過程跟釀酒有關系嗎?
釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),又稱面包酵母或者出芽酵母,細胞為球形或者卵形,直徑5-10μm,是第一個完成基因組測序的真核生物,測序工作于1996年完成。
作為一種單細胞真核生物,釀酒酵母具有一切真核細胞生命活動最基本特征,又有實驗所需微生物應具備的代謝周期快、生長迅速、操作方便等許多優點,一直是基礎及應用研究的主要對象,在2000年被NIH選為標準微生物模型系統,在食品、醫藥等領域應用廣泛。
重組全釀酒酵母疫苗是一種新型的基因工程疫苗,以釀酒酵母菌作為抗原表達載體構建的重組全酵母疫苗,既能攜帶特異性目的抗原,又能揮發出免疫佐劑作用,能有效地誘導出抗原特異性的免疫應答,該類疫苗已在抗腫瘤及抗病毒感染的防治研究中,顯示出了很好的研究價值和應用前景。
1981年開始用釀酒酵母表達外源基因,目前利用釀酒酵母為宿主系統表達了許多外源基因產物,如乙型肝炎疫苗、人胰島素、人粒細胞集落刺激因子、人血管抑制素等。
釀酒酵母在自然界中分布較廣,屬于兼性厭氧微生物,主要是從冰葡萄汁或柑橘果中利用酵母浸出粉胨葡萄糖培養基和麥芽汁瓊脂平皿培養基分離純化而來。
1、富集培養:取適量樣品加入富集培養基,進行目標菌株富集;
2、梯度稀釋:將富集培養液按10倍梯度進行稀釋;
DW-9系列微生物試劑分液器
DW-9系列微生物試劑分液器是一款精密輸送液體的電子蠕動泵分液系統,適用于培養基、緩沖液和稀釋液的自動批量分裝,廣泛應用于各種食品、藥品企業、政府檢測機構和科研單位的專業微生物實驗室。
3、分離純化:取梯度稀釋液均勻涂布于分離培養基,放置培養箱進行培養,然后再進行目標菌株的初篩及復篩;
DW-16型自動細菌涂布接種儀
DW-16型自動細菌涂布接種儀由放置培養皿的可旋轉平臺(自動)和可變速驅動電機組成,是杭州大微專為“經典培養法”微生物實驗中的“細菌涂布接種”環節而設計制造,塑料平皿適用。
4、菌種鑒定:通過形態學特征并結合生理生化實驗進行菌株鑒定。
杭州大微DW-M80型自動微生物生化鑒定系統通過生化反應原理(包括酶底物反應/糖利用反應/同化反應/氨基酸實驗等)捕獲細菌的生化表型特征,對微生物進行鑒定;結合微生物激光透射比色法,對抗菌藥敏試驗進行分析。
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