簡介
硅藻分布廣泛,除江、河、湖、海等自然水體外,自來水、濕潤的土壤、空氣及某些食物中均可能存在硅藻,因此硅藻檢驗過程中應做好污染防范。
對于檢材提取,近年來國內(nèi)外均提出了詳細的規(guī)定,
例如,解剖、取材必須嚴格按規(guī)定順序進行,所使用的器械、試劑、耗材均應不含硅藻,盡量使用一次性耗材等[1-3]。
目前,國內(nèi)常規(guī)的取材器官為肺、肝、腎;對于腐爛尸體,骨髓及牙髓被認為是可靠的檢材[1]。
實踐中,有些解剖室設施不符合要求,無防污染設備,自來水不經(jīng)處理直接接觸尸體或器官,缺乏一次性取材工具;
有些法醫(yī)防污染意識不強、取材不規(guī)范,這些因素導致污染時有發(fā)生。
實驗結果對比
未做防污染措施
同一案件(股骨骨髓中檢出硅藻)
已做防污染措施
同一案件(股骨骨髓中未檢出硅藻)
未采取防污染措施
股骨骨髓中檢出的硅藻
骨髓中檢出硅藻的尺寸
長徑59.93μm,
短徑20.81μm
小結:原案件檢測結果為陰性,對比實驗-未做防污染措施,檢材中檢出較多硅藻,結果誤判為陽性。
防污染工具
1
硅藻提取包
硅藻提取包
鋪巾
手套
塑料試管
密封袋
鑷子
手術刀
注釋:一次性使用,防止交叉污染。
2
儀器設備
水質不低于 GB/T 6682—2008 規(guī)定的二級水。
-用于前處理所有步驟,每個步驟都不用自來水。
純水儀
01
通風櫥
02
通風櫥應以耐酸、耐堿材料建造。
-保護人員防止有毒氣體危害的一級屏障。
3
取材
參照法庭科學 硅藻檢驗技術規(guī)范 微波消解-真空抽濾-顯微鏡法(GA/T 1662-2019)。
臟器組織取材過程
1
肝:切除肝臟表面組織,切取約10g深部組織。
2
腎:沿腎外緣縱向切開剝離包膜,切取約10g深部組織。
3
肺:切除肺表面組織,切取約2g組織。
純水清洗檢材
切取
切除器官表面組織
切取深部組織
稱量深部組織
注釋:均在通風櫥內(nèi)操作。
骨髓取材過程
1
刮凈骨骼上的軟組織和骨膜;
2
用純水沖洗骨骼3次;
3
鋸開骨干,用手術刀去除與鋸片接的骨髓組織;
4
用刮匙刮取全部骨髓組織,置塑料盒(或塑料袋、塑料試管)中;
5
取約10g骨髓組織,參見附錄C中每個消解罐中骨髓組織量,將其均分為若干份,分別置于塑料試管中;
6
剩余組織置于原包裝物中冷凍保存。
取材—因表層組織可能在解剖、運輸過程中被污染,故只取器官的深部組織。
防污染的意義
近年來硅藻檢驗方法的靈敏度顯著提高,溺死尸體硅藻陽性率已從約30%提高至95%以上,然而“假陽性”的風險也隨之增大,檢驗中可能導致假陽性結果的因素包括解剖室和實驗室中的自來水、工具器械、取材和前處理步驟等。
文獻[4]報道了一個“假陽性”案例,總結產(chǎn)生污染的原因為就地解剖取材、重復使用器械。因此,硅藻檢驗實踐中污染防范至關重要,需高度重視。
參考文獻
[1] 趙子琴.法醫(yī)病理學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社, 2012:316-328.
[2] Hurlimann J,Feer P,Elber F, et al. Diatom detection in the diagnosis of death by drowning[J].International Journal of Legal Medicine,2000,114(1-2):6-14.
[3] 中華人民共和國公安部.硅藻檢驗技術規(guī)范 微波消解-真空抽濾-顯微鏡法:GA/T 1662-2019[S].北京:中國標準出版社,2019.
[4] 趙建,馬雁兵,石河,等.水中尸體硅藻檢驗污染1例[J].法醫(yī)學雜志,2017,35(5):554-555.
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