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實(shí)時(shí)熒光定量PCR注意事項(xiàng)
1.按照正確的開關(guān)機(jī)順序操作,有助于延長(zhǎng)儀器的使用壽命,減少儀器出故障的頻率.開機(jī)順序：先開電腦,待電腦*啟動(dòng)后再開啟定量PCR儀主機(jī),等主機(jī)面板上的綠燈亮后即可打開定量PCR的收集軟件,進(jìn)行實(shí)驗(yàn).關(guān)機(jī)順序：確認(rèn)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)結(jié)束后,首先關(guān)閉信號(hào)收集軟件,然后關(guān)掉定量PCR儀主機(jī)的電源,關(guān)閉電腦.
2.應(yīng)該定期備份您的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),備份頻率推薦每周一次,用光盤刻錄.同時(shí)您也應(yīng)該備份定量PCR儀的各種純熒光光譜校正文件、背景文件和安裝驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),這些文件所在的目錄是C：/Appliedbiosystems/SDSDocument.
3.良好的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境有助于延長(zhǎng)儀器的使用壽命,減少儀器出故障的頻率.推薦做到以下幾個(gè)方面：
電源：推薦配備合適的UPS或穩(wěn)壓器.
通風(fēng)：儀器的通風(fēng)應(yīng)該沒有阻擋.
溫度：推薦實(shí)驗(yàn)室配備空調(diào),溫度應(yīng)該控制在10-30°C之間.
濕度：20-80%；對(duì)于潮濕的省份,推薦實(shí)驗(yàn)室配備除濕機(jī).
空間：易于操作,安全.
4.怎樣判斷定量PCR儀的樣本加熱塊是否被污染?怎樣清除污染
一個(gè)辦法是運(yùn)行背景校正反應(yīng)板,當(dāng)一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)孔連續(xù)顯示出不正常的高信號(hào),則表明該孔可能被熒光污染物.另外一種辦法是在不放任何物品到樣本塊上的前提下,執(zhí)行ROI的校正,當(dāng)某個(gè)孔的信號(hào)明顯高出其他孔時(shí),則表明該孔被污染.
清除樣本加熱塊污染的步驟如下：用移液器吸取少量乙醇并滴入每個(gè)污染的反應(yīng)孔中.吹打數(shù)次.將廢液吸入廢液杯中.重復(fù)以上步驟：乙醇三次,去離子水三次.確認(rèn)反應(yīng)孔中的殘留液體蒸發(fā)完.
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