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賽默飛液相色譜檢測銀杏制劑中銀杏內酯

來源:賽默飛色譜及質譜   2022年11月25日 11:09  

銀杏內酯化合物屬于萜類化合物,由倍半萜內酯和二萜內酯組成,是銀杏葉中一類重要的活性成分。銀杏內酯對血小板活化因子(PAF)受體有強大的特異性抑制作用,PAF是血小板和多種炎癥組織分泌產生的一種內源性磷脂,是迄今發現的有效的血小板聚集誘導劑,它與許多疾病的產生、發展密切相關。而銀杏內酯目前認為是最有臨床應用前景的天然PAF受體拮抗劑,其拮抗作用活性與化學結構密切相關。

 

對于銀杏內酯的分析,因其紫外吸收弱,多采用HPLC-ELSD方法。中國藥典2010版分析銀杏內酯采用正丙醇-四氫呋喃-水,反相色譜分析,所使用溶劑為非常規溶劑,且正丙醇的沸點接近100℃,在檢測器上揮發性不好,容易導致噪音增加,導致方法重復性差。另外,由于ELSD靈敏度較低,使用的對照品量較大。而電霧式檢測器(CAD)是一種通用型檢測器,具有寬的動態范圍和低至ng級的檢測靈敏度,它的檢測不依賴于分析物光學性質,也不依賴于分析物在氣相中離子化的能力,能夠檢測所有非揮發性的物質,同時適用于各種分離模式,如等度、梯度,HILIC,離子交換,SFC和SEC等。

 

本方法采用HPLC-CAD方法,采用常規反相色譜溶劑,并且使用靈敏度更高的CAD檢測器,改善了藥典方法的上述缺點。分析柱:Acclaim 120 C18,5 µm,150×4.6mm, P/N:059148;柱溫:35℃;檢測方式:電霧式檢測器(CAD)Corona Ultra,霧化溫度 35 ℃,采集頻率10Hz;進樣量:1 µL;流動相條件:甲醇-水,梯度洗脫,流動相條件見表2-27;標準品測定譜圖見圖2-40。

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在靈敏度方面,相同濃度標準進樣相同體積,在CAD檢測器和ELSD檢測器上比較各峰的靈敏度(表2-28)。結果顯示,CAD檢測的靈敏度也比ELSD高2倍以上。因此,對于銀杏內酯檢測,CAD檢測器可以獲得比ELSD更好的靈敏度。銀杏葉片制劑分析結果見圖2-41。本實驗充分表明電霧式檢測器具有寬的動態響應范圍和較高的靈敏度,較ELSD具有更好的穩定性,是測定無紫外吸收物質的選擇。

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