Western Blot(WB)實驗技術服務一步到位
信帆生物提供Western Blot(WB)實驗技術服務,老師僅需要提供樣本,我們提供實驗外包服務。
預實驗的內容如下:
1)確定一抗的稀釋比例和孵育時間;
2)選擇合適的封閉液及封閉時間;
3)調節合適的上樣量,使內參條帶灰度值趨于一致。
抗體使用有哪些注意事項?
使用抗體前需仔細閱讀說明書,了解抗體的保存條件以及不同用途下的推薦稀釋比例。較高濃度的抗體(>0.5mg/mL)通常性質更穩定,受生產工藝和成本控制等因素影響,不同品牌的抗體的濃度也不相同,所以購買時應注意比較,經驗不足的實驗者往往被抗體的體積迷惑,要注意相同質量下低濃度的抗體體積反而更大。
實驗流程:
蛋白提取-制膠-電泳-轉膜-封閉-一抗孵育-二抗孵育-化學發光-結果分析;
送樣運輸要求:新鮮組織,100mg以上,干冰運輸。細胞量為5*10^6以上,收集細胞沉淀,干冰運輸。
WB相關檢測樣本準備及要求
WB檢測:(檢測某種蛋白的有無及含量差異)
組織樣本:
1、 組織取樣時洗凈血污,液氮或干冰速凍-80℃保存,保存時間3個月內為宜,時間過長蛋白可能降解。
2、標本量100mg(黃豆大?。┮陨?。骨頭、脂肪蛋白含量較少組織需提供200-300mg。
細胞樣本:
1.活細胞匯合度70%-80%,裝滿新鮮培養基,不透氣培養瓶,封口膜封口常溫運輸;
2.細胞沉淀;
3.細胞上清,干冰運輸。
其他特殊要求:
如客戶提供試劑盒,要求提取特殊蛋白,需要提前和實驗室溝通,并且準備好實驗樣本,保證樣本量充足。
信帆生物對質量的控制涵蓋生產、放行、市場質量反饋的全過程,包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過程及成品的質量標準和分析方法的建立、取樣、檢驗和產品穩定性考察和市場不良反饋樣品的復核等工作,確保產品的精確度、穩定性。
Western Blot(WB)實驗技術服務一步到位
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