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上海漢堯聯(lián)合熙華藥業(yè)推出寡核苷酸類(lèi)藥物的低殘留分析方法

來(lái)源:上海漢堯儀器設(shè)備有限公司   2023年03月10日 10:30  


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上海漢堯&熙華藥業(yè)

寡核苷酸類(lèi)藥物的低殘留分析方法

實(shí)驗(yàn)部分

結(jié)果討論

獲取進(jìn)步




前言

寡核苷酸藥是一類(lèi)由10~50個(gè)堿基構(gòu)成的核苷酸類(lèi)化合物,可以在RNA水平調(diào)控疾病相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄及翻譯過(guò)程。其分子量介于傳統(tǒng)小分子和大分子化合物之間,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,極性大,給相關(guān)的分析及質(zhì)量研究工作帶來(lái)了挑戰(zhàn)。

目前,針對(duì)寡核苷酸藥物的色譜分析方法主要有陰離子交換色譜法、離子對(duì)色譜法以及毛細(xì)管電泳法等。但寡核苷酸藥物易與玻璃及金屬材質(zhì)發(fā)生非特異吸附,導(dǎo)致嚴(yán)重的系統(tǒng)殘留,給分析工作帶來(lái)極大的挑戰(zhàn)。近期上海漢堯聯(lián)合熙華藥業(yè)使用YMC-BioPro QA-F色譜柱開(kāi)發(fā)了一種基于離子交換原理的寡核苷酸藥物分析方法,旨在通過(guò)色譜柱及方法的優(yōu)化,減少該類(lèi)樣品在常規(guī)色譜儀器上的非特異吸附問(wèn)題。同時(shí)該方法的專(zhuān)屬性、靈敏度、重復(fù)性?xún)?yōu)良,可以在不升級(jí)設(shè)備的前提下,直接用于寡核苷酸類(lèi)藥物的常規(guī)分析檢測(cè)。


實(shí)驗(yàn)部分

1

樣品

15-25個(gè)堿基對(duì)的短鏈寡核苷酸樣品

(由生工生物提供)

2

儀器及條件

高效液相色譜儀

Agilent 1260

檢測(cè)器

UV

色譜柱

YMC-BioPro QA-F

(5μm, 100*4.6mm)

YMC,  P/N: QF00S05-1046WP


結(jié)果與討論

1

 寡核苷酸混合對(duì)照品圖譜

 圖1.15-25BP寡核苷酸混合對(duì)照品放大圖譜

(19BP和20個(gè)堿基對(duì)的寡核苷酸樣品未被有效分離)

2

 殘留測(cè)試

圖2為50μg/ml寡核苷酸樣品溶液/空白溶液進(jìn)樣前后的對(duì)比色譜圖,結(jié)果顯示色譜柱及系統(tǒng)殘留率僅為0.1%。

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圖2.寡核苷酸溶液和空白溶液殘留對(duì)比圖譜

3

重復(fù)性

圖3結(jié)果表明本方法重現(xiàn)性和精密度良好。

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圖3.50μg/ml樣品溶液重復(fù)性色譜圖

4

靈敏度

如圖4所示,通過(guò)推算,可以得知該方法的檢測(cè)限和定量限約為20ng/mL和50ng/mL。

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圖4 0.5μg/mL樣品靈敏度溶液色譜圖

5

線性

如圖5所示,10-50 μg/mL范圍內(nèi)O24的線性擬合結(jié)果,R2 ≥0.999。

圖片

圖5  10-50 μg/ml線性圖




實(shí)驗(yàn)結(jié)論

綜上所述,

使用YMC-BioPro QA-F, 5μm, 100*4.6mm(P/N: QF00S05-1046WP)色譜柱開(kāi)發(fā)的檢測(cè)寡核苷酸方法分離能力強(qiáng),且該方法專(zhuān)屬性、精密度、工作曲線相關(guān)性等均非常優(yōu)異,在常規(guī)液相設(shè)備上殘留極小,可以作為寡核苷酸類(lèi)藥物的含量及雜質(zhì)控制的優(yōu)選解決方案。

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關(guān)于熙華藥業(yè)

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熙華藥業(yè)是上海熙華檢測(cè)技術(shù)服務(wù)有限公司的全資子公司,可提供符合中西方注冊(cè)申報(bào)要求的創(chuàng)新和仿制化學(xué)藥物的藥學(xué)CMC開(kāi)發(fā)一體化服務(wù),除此之外熙華藥業(yè)還有專(zhuān)門(mén)的中間體和符合cGMP的原料藥、臨床試驗(yàn)用制劑生產(chǎn)車(chē)間。




掃碼關(guān)注
上海漢堯儀器設(shè)備有限公司

作為專(zhuān)業(yè)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)提供商,上海漢堯一直專(zhuān)注于為中國(guó)的生物制藥/食品/化工實(shí)驗(yàn)室行業(yè)用戶(hù)提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),依托合作伙伴的支持,我們從單一產(chǎn)品銷(xiāo)售,逐步發(fā)展成為實(shí)驗(yàn)室消耗品/儀器/設(shè)備的綜合服務(wù)商。已經(jīng)合作的客戶(hù)中,包括了眾多國(guó)內(nèi)頂級(jí)的制藥/CRO、CMO/藥檢/大學(xué)/研究所/精細(xì)化工領(lǐng)域用戶(hù)。


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