二氧化碳培養箱:細胞培養小科普
大家有沒有試過,把培養基凍起來,顏色會有變化嗎?顏色一開始變黃!解凍以后,又會慢慢變紅!為什么呢?
1
如果凍的液體是水,或是緩沖液,顏色會有變化嗎?
并不會有變化!
原因是因為,培養基中會加入酸堿指示劑,例如酚紅,用于檢測培養基的酸堿性。當培養基酸性增加時,酚紅會呈現黃色,當培養基堿性增加時,酚紅會呈現紅色。
在細胞培養過程中,細胞代謝會產生酸性代謝產物,使培養基酸性增加,因此培養基會逐漸變黃。當培養基解凍后,酸性代謝產物逐漸消耗,培養基的酸性減少,導致酚紅顏色逐漸變回紅色。
如果凍結的液體是水或緩沖液,一般不會出現顏色的變化。這是因為水和緩沖液不含有酸堿指示劑,所以當其凍結和解凍時,顏色不會發生變化。
2
為什么細胞培養基冷凍以后,會變酸呢?
細胞培養基凍結后變酸的原因是由于冰凍過程中,液體中的二氧化碳和其他氣體會逸出。冰結過程中,水分子會有序排列形成晶體,氣體無法溶解在冰中,因此逸出。培養基中二氧化碳的減少會導致酸堿度的變化,使培養基變酸,從而導致培養基的顏色變黃。
3
培養箱的CO2濃度為什么要設置5%?
培養箱的CO2濃度設置為5%是為了模擬細胞/組織在生物體內的生長環境,并提供適合細胞體外培養的條件。培養箱要求穩定的溫度、CO2水平、酸堿度和濕度,其中CO2濃度的穩定性對細胞培養非常重要。
以常用的細胞培養基DMEM為例,其碳酸氫鈉濃度為1.5g/L。廠家已經測試好對應的培養箱濃度在5%左右,假如該培養基碳酸氫鈉濃度變為3g/L,則培養箱CO2濃度應維持在10%。
國外常用的培養條件就是,1升培養基里含3克NaCO3,CO2培養箱的濃度是10%。而國內大多數是5%的濃度,相對應的培養基內碳酸氫鈉濃度就在1.5g/L左右。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。