高效液相色譜法（英語：high performance liquid chromatography，縮寫 HPLC），又譯高效液相層析法，以前曾指高壓液相層析法是一種色譜分析技術(shù)，用來分離混合物，以確認(rèn)并量化各個成分的比例。它依賴泵加壓樣品以令其通過填充有吸附劑的壓力柱，導(dǎo)致樣品的各個成分因而分離。高效液相色譜法常用于生物化學(xué)和分析化學(xué)。

 高效液相層析儀根據(jù)各種各樣的化工互作用力來分離混合物。這種互作用力通常是分析物及分析管柱之間的一種非共價性質(zhì)。使用高效液相色譜時，液體待檢測物在不同的時間被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，每個峰頂都代表一個另外化合物的種類，最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì)。
    以液體為流動相而設(shè)計的色譜分析儀器稱為液相色譜儀。采用高壓輸液泵，高效固定相和高壓靈敏檢測器等裝置的液相色譜儀成為高效液相色譜儀。高效液相色譜儀種類繁多，但不論何種類型的高效液相色譜儀，基本上都分為4個部分：高壓輸液裝置，進(jìn)樣系統(tǒng)，分離系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)。

    高效液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中，常用于醫(yī)藥品、化學(xué)、環(huán)保、生命科學(xué)、與食品工業(yè)的研究上。
    高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別，它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相，可將液體混合物中的成份分離、成分定性及定量分析。適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。例如：可檢測分析食品中的三聚氰胺的含量。