細胞外囊泡(EVs)是指在生理和病理狀態下,機體內細胞通過細胞吞咽形成作用多泡小體后,通過細胞膜融合到細胞外環境中的微小囊泡,根據囊泡尺寸大小,可將EVs分為三類:凋亡小體(>1000 nm)、微囊泡(100~1000 nm)、外泌體(30~100 nm)。大量研究表明細胞死亡的EVs也出現異常;其內部的多種分子顯著改變。與傳統的疾病診斷標志物相比,EVs可在體液中穩定存在且半期衰長,加之堿雙分子層的保護作用,EVs可定量輸送RNA和蛋白質等生物信息分子至吸取細胞,且EVs廣泛分布于體液中,取材方便,創傷小,因此EVs有可能成為一種新型的疾病診斷標志物。EVs仍屬于一個較新的領域,Vs形態學常用的檢測方法有頭部電子顯微鏡、動態光散射、納米顆粒跟蹤分析儀(Nanosight)、Western blot、流式分析技術等。其中頭部電子顯微鏡技術可直接觀察EVs形態,但對樣品質量要求較高、實驗前處理復雜且實驗中較難洞察EVs和精度顆粒。動態光掩模和Nanosight可反映EVs的大小分布,Nanosight可直接檢測EVs的濃度,但要求樣本采樣高,無法區分大小不同聚集體、批量溶液及EVs。Western blot實驗只能對EVs進行定性;無法避免細胞蛋白的污染,直至蛋白找到EVs的蛋白質標志物。流式技術能夠實現,高蛋白、單顆粒、同時檢測多個參數的分析,是目前頗具潛力評價臨床的外泌體分析技術。傳統的流式細胞儀檢測下限為500納米,外泌體多被當成噪音而忽略。近年來不斷開發新技術來滿足外泌體分析要求,將檢測提高到20納米,很大限度提升了流式技術分析外泌體的能力,確認和解決將不會再成為流式技術分析外泌體的瓶頸。目前,困擾流式技術分析外泌體的問題同樣如此集中,樣品的前處理、流式方法的標準化、外泌體標志物的尋找。廣州煥彩流式實驗室在囊泡檢測方法學通過傳統流式進行了大量的實驗測試和方法學改進,不斷完善方法學。
所用儀器型號
3激光14色流式細胞儀LongCyteTM
關于層浪流式細胞儀
一、靈敏度高
微小粒子可以檢測
二、省錢多能手——自動進樣無需單獨配備
三、具有計數功能,精準高效,無需輔助耗材
四、小巧可愛又高配多能
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