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ELSD革新技術(shù)帶來無與倫比的LNP分析體驗 | 安捷倫脂質(zhì)納米顆粒分析解決方案
剛剛過去的金秋十月里，諾貝爾生理學或醫(yī)學獎如期而至，mRNA 疫苗開發(fā)者 Katalin Kariko 博士和 Drew Weissman 博士獲此殊榮。基于 mRNA 技術(shù)的新冠疫苗改變了全球?qū)剐鹿诘母窬郑麄兊墨@獎是眾望所歸。在 mRNA 的眾多前沿技術(shù)中，脂質(zhì)納米顆粒（LNP）技術(shù)顯得至關(guān)重要，它是 mRNA 進入人體內(nèi)的必須運送載體。
脂質(zhì)納米顆粒的研究可以追溯到上世紀 80 年代，科學們通過不斷的探索和實驗，找到了各種適合的脂質(zhì)。利用微流體技術(shù)將脂質(zhì)和核酸進行混合，從而成功制備出納米脂質(zhì)顆粒。根據(jù)組成脂質(zhì)納米顆粒的脂質(zhì)特性（圖 1），我們選擇使用 Infinity II LC 液相色譜系統(tǒng)對 LNP 進行分析和表征。
圖 1. 脂質(zhì)納米顆粒的示意圖
以上市的 RNAi 藥物 Onpattro 為例，采用 HPLC-ELSD 分析方法，1290 Infinity II ELSD 檢測器針對無紫外吸收的四種脂質(zhì)具有較高的靈敏度和較好的穩(wěn)定性，完全滿足實際樣品的分析需求（圖 2）。
圖 2. LNP 中四種脂質(zhì)的色譜圖
隨著 LNP 技術(shù)的不斷更新，可電離脂質(zhì)的種類變得越來越豐富，新冠 mRNA 疫苗的 LNP 由可電離陽離子脂質(zhì)（SM-102）、聚乙二醇聚合物、膽固醇和 DSPC 組成，基于以上方法，也可以將這四種脂質(zhì)進行很好的分離和準確定量（圖 3）。
圖 3. 新冠 mRNA-LNP 疫苗中四種脂質(zhì)的色譜圖
基于 1290 Infinity II UHPLC 和 1290 Infinity II ELSD 的超高效液相色譜系統(tǒng)，可以實現(xiàn)超快速高效率的 LNP 分析，總的分析時間在 5 分鐘以內(nèi) [2]（圖 4），極大提升分析效率。
圖 4. UHPLC-ELSD 分析 LNP 色譜圖（七針疊加圖）
在 UHPLC-ELSD 的基礎(chǔ)上引入了單桿質(zhì)譜 MSD，與 ELSD 并聯(lián)于 UHPLC 系統(tǒng)中（圖 5），作為脂質(zhì)降解物定性分析的工具，可以清晰看到脂質(zhì)及其降解產(chǎn)物質(zhì)譜圖（圖 6），從而可以對降解雜質(zhì)進行深入研究。
圖 5. UHPLC-ELSD/MS 儀器連接示意圖
圖 6. 脂質(zhì)分析的質(zhì)譜圖
安捷倫最新的 1290 Infinity II ELSD 檢測器，配置了特殊光電倍增管和性能出眾的激光器件，靈敏度比常規(guī) ELSD 高出 5-10 倍，更適合痕量分析（圖 7）。獨特的霧化噴頭設(shè)計，具有出色的穩(wěn)定性，為使用者提供可靠、準確的分析結(jié)果。
圖 7. 1290 Infinity II ELSD 檢測器更高的靈敏度
結(jié)語
Infinity II LC 儀器搭配 1290 Infinity ELSD 檢測器（或單桿質(zhì)譜）為脂質(zhì)的研究帶來了嶄新的分析體驗，隨著脂質(zhì)納米顆粒 LNP 研究的深入，安捷倫的液相色譜技術(shù)將助力 LNP 應(yīng)用于更廣闊的領(lǐng)域。
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