植物組織培養(yǎng)中一部分抗生素被用于去除或者抑制微生物生長,如青霉素、氯霉素、利福平等;另一部分用于抗性篩選的抗生素,如潮霉素B、G418、雙丙氨膦等,他們大多數(shù)能夠抑制或者干擾某些重要蛋白質(zhì)的合成,可以在含有這些抗生素的培養(yǎng)基中篩選得到目的植株的陽性克隆。
每種抗生素的抑菌譜不同,不同的植物對(duì)抗生素表現(xiàn)出不同的敏感性。例如,一種抗生素對(duì)某些植物的毒性很小,而對(duì)其他物種的毒性是極大的。所以沒有固定推薦的使用濃度,建議抗生素在使用之前,應(yīng)該對(duì)樣本相對(duì)于抗生素的敏感性進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),確定藥物使用最佳濃度和最佳作用時(shí)間,然后開展正式的實(shí)驗(yàn)。
一般來說,抗生素需要儲(chǔ)存在冰箱中。氨基糖苷類抗生素(如卡那霉素)具有吸濕性,應(yīng)儲(chǔ)存在干燥器中。所有抗生素都應(yīng)不受陽光直射。利福平和兩性霉素B對(duì)光非常敏感,應(yīng)該儲(chǔ)存在黑暗中。多數(shù)抗生素對(duì)熱敏感,需要過濾滅菌,最好是現(xiàn)用現(xiàn)配,盡量減少溶液反復(fù)凍融次數(shù),防止抗生素失效。
n 羧芐青霉素(貨號(hào):C346)
羧芐青霉素是一種白色至灰白色、吸濕性粉末,可溶于水。羧芐青霉素對(duì)革蘭氏陰性菌有效,但對(duì)革蘭氏陽性菌也有一定的作用。據(jù)報(bào)道,羧芐青霉素水溶液在35℃、pH 5.5下穩(wěn)定40小時(shí)。溶液可以在-20℃儲(chǔ)存24個(gè)月。羧芐青霉素對(duì)多種植物的毒性相對(duì)較低,據(jù)報(bào)道,在植物組織培養(yǎng)中使用的濃度可高達(dá)1000 mg/L。
n 頭孢噻肟鈉(貨號(hào):C380)
頭孢噻肟鈉是一種白色到灰白色的粉末,可以溶于水。新制備的溶液顏色的變化并不一定表明效力的變化。需儲(chǔ)存在一個(gè)防光的密封容器中。頭孢噻肟鈉的水溶液在pH值范圍為4.3-6.2時(shí)最為穩(wěn)定。溶液可在-20°C下保存48個(gè)月。頭孢噻肟鈉對(duì)革蘭氏陰性有效。
n 潮霉素B(貨號(hào):H370)
潮霉素B是一種氨基糖苷類抗生素,對(duì)原核微生物和真核微生物和細(xì)胞均有效。推薦濃度范圍為10 - 400µg/mL。原液可在2-6℃下儲(chǔ)存至少1年;溶液不應(yīng)冷凍,因?yàn)檫@樣會(huì)降低其效力。
上述小編只是簡(jiǎn)單介紹了下常用抗生素的基本性能,下方小編總結(jié)了PhytoTech Labs部分常見抗生素的分子量、抗性等特性,方便廣大植物學(xué)客戶選擇:
品名 | 貨號(hào) | 分子量 | 革蘭氏陽性菌 | 革蘭氏陰性菌 | 分枝桿菌 | 真菌 | 支原體 | 植物毒性濃度2 | 溶劑 |
兩性霉素B | A119 | 924.1 | ++ | >5 | DMSO | ||||
氨芐青霉素 | A116 | 371.4 | ++ | ++ | 100 | Water | |||
羧芐青霉素 | C346 | 422.4 | + | ++ | >1000 | Water | |||
頭孢噻肟鈉 | C380 | 477.4 | + | ++ | >100 | Water | |||
頭孢氨芐 | C1970 | 365.4 | ++ | + | Water | ||||
氯霉素 | C252 | 323.1 | ++ | ++ | + | + | 1-64 | EtOH | |
G418 | G810 | 692.7 | 50 | Water | |||||
硫酸慶大霉素 | G570 | 575.7 | + | ++ | ++ | 80 | Water | ||
潮霉素B | H370 | 527.5 | 20-400 | Water | |||||
卡那霉素 | K378 | 582.6 | ++ | ++ | ++ | 2 | Water | ||
多粘菌素B | P6809 | 1385.6 | ++ | Water | |||||
利福平 | R501 | 822.9 | ++ | ++ | ++ | 100 | Water | ||
壯觀霉素 | S742 | 405.3 | + | ++ | 500 | Water | |||
硫酸鏈霉素 | S739 | 1457 | ++ | ++ | 16 | Water | |||
特美汀 | T869 | NA | ++ | 200 | Water | ||||
鹽酸萬古霉素 | V870 | 1485 | ++ | 80 | Water |
注:1、+ + =對(duì)大多數(shù)微生物有效,+ =對(duì)某些微生物有效
2、由于不同種類的植物對(duì)抗生素的毒性敏感性存在很大差異,表中所示的植物毒性濃度可能會(huì)更高或更低。
西美杰代理的PhytoTech Labs是美國的植物培養(yǎng)基供應(yīng)商,公司從1997年成立不斷發(fā)展壯大,現(xiàn)已服務(wù)于研究院所及生產(chǎn)研發(fā)企業(yè)。PhytoTech Labs通過ISO 9001:2000質(zhì)量體系認(rèn)證,所有產(chǎn)品按照cGMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)和包裝,生產(chǎn)過程受到嚴(yán)格質(zhì)量控制,每個(gè)產(chǎn)品的物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)特性都經(jīng)過了嚴(yán)格檢測(cè),并經(jīng)過組織培養(yǎng)檢測(cè)。產(chǎn)品線包含植物組培培養(yǎng)基、植物凝膠、生長調(diào)節(jié)劑、抗生素和常見生化試劑。
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