植物吸收的磷主要是H2PO4-的形態,因此土壤中速效磷含量是評價土壤對作物磷供應能力的一種手段,對于施肥有著直接的指導意義。用弱堿法提取堿溶性磷和吸附態磷,鉬藍與磷酸根生成880nm有特征吸收峰的物質,通過測定880nm光吸收,即可計算磷含量。
一、正式實驗:
1、若預實驗測定吸光值超出標準吸光值線性范圍:高于最高值建議將樣本適當稀釋后再進行測定,低于低值建議適當增加樣本質量W后再進行測定,并將改變后的W和D代入公式計算;
2、確定好最適實驗條件后,正式實驗樣本制備同預實驗樣本制備;
3、正式實驗按照預實驗上機操作步驟進行(標準管和空白管預實驗已做,正式實驗可選做)。
二、結果計算:
1、以各個標準溶液的濃度為x軸,其對應的ΔA標準為y軸,繪制標準曲線,得到標準方程y=kx+b,將ΔA測定帶入方程得到x(μg/mL)。
2、按樣本質量計算:
土壤速效磷含量(μg/g土樣)=x×V1÷(W×V1÷V)×D=x÷W×D
V1:加入樣本體積,0.04mL; V:加入提取液體積,1mL;
W:樣本質量,g; D:稀釋倍數,未稀釋即為1。
三、注意事項:
1、工作液應現配現用,正常顏色為淺黃色,如有變色或變藍則均為失效。
2、此法具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管或EP管等試驗器材均要求嚴格無磷。
3、顯色結束后應立即檢測。
4、用96孔板檢測時,注意板孔中的液體有無氣泡,如有氣泡應排除氣泡后再測定OD值。
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