細(xì)胞爬片的特點(diǎn),操作注意事項(xiàng)及其保存方式
在醫(yī)學(xué)生物研究中,免疫熒光檢測(cè)等需用到細(xì)胞爬片。細(xì)胞爬片是什么?其名為爬片,外文名稱(chēng)為Round Coverslip, 用于各類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)板中,讓細(xì)胞在爬片上生長(zhǎng),后續(xù)實(shí)驗(yàn)可直接使用,避免了細(xì)胞從培養(yǎng)板轉(zhuǎn)移到載玻片上的損傷。細(xì)胞爬片采用玻璃片,經(jīng)滅菌,TC等處理后制作而成,可促進(jìn)細(xì)胞在玻片上貼壁生長(zhǎng)與形態(tài)伸展,在后期免疫組化、免疫熒光、原位雜交等處理過(guò)中也不易脫片。
細(xì)胞爬片特點(diǎn)以及規(guī)格:
- 無(wú)污染,免清洗,節(jié)省實(shí)驗(yàn)員的時(shí)間。
- γ射線滅菌,無(wú)熱源、無(wú)DNA酶、無(wú)RNA酶。
- 化學(xué)穩(wěn)定性好,耐受實(shí)驗(yàn)室常用溶劑。
- 機(jī)械切割,邊緣整齊,取用安全方便。
細(xì)胞爬片操作注意事項(xiàng):使用細(xì)胞爬片時(shí)(比如在六孔板中放入爬片,六孔板的孔底面積往往會(huì)比爬片面積多出一部分,加細(xì)胞懸液時(shí)常常就是細(xì)胞鋪滿(mǎn)整個(gè)孔底,有時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)邊集現(xiàn)象,就是靠近壁邊緣密度要高些,這樣處于中央玻片上爬的細(xì)胞數(shù)量就可能相對(duì)較少)
比較好的做法是將玻片放入孔板的孔內(nèi)后,加細(xì)胞懸液時(shí)只滴到玻片上,一直滴到液體布滿(mǎn)整個(gè)玻片又不會(huì)溢出玻片邊緣(因?yàn)橐后w表面張力作用可以很容易做到這一點(diǎn)!),放在培養(yǎng)箱里,等細(xì)胞貼壁后,取出,再滴加培養(yǎng)基布滿(mǎn)整個(gè)孔底,繼續(xù)培養(yǎng),這樣玻片上的細(xì)胞生長(zhǎng)的密度就會(huì)很集中。
保存方式:經(jīng)TC處理的細(xì)胞爬片只需RT保存,在超凈臺(tái)無(wú)菌的狀態(tài)下打開(kāi)包裝;未用完的爬片按原先包裝方式再包裝起來(lái)即可。
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