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人血白蛋白是由乙型肝炎疫苗免疫健康人的血漿經低溫乙醇蛋白分離法提取并經病毒滅活后制成。用于治療因失血、創傷和燒傷引起的休克,腦水腫及大腦損傷所致的腦壓增高,防治低蛋白血癥以及肝硬化或腎病引起的水腫或腹水。蛋白質含量是人血白蛋白質量評價的重要指標。
常規的白蛋白含量的測定方法是:血細胞分析儀,雙縮脲比色法,凱氏定氮,紫外光吸收法等方法均需加入試劑,增加反應時間,實驗步驟繁多,費時復雜。本方法是根據不同介質的折射率不同的物理特性,通過折射率讀數,計算出蛋白含量。
2010 版中國藥典第三部明確將折光法運用于單份血漿中蛋白質含量的測定
儀器
Abbemat 500 折光儀
樣品
人血白蛋白,免疫球蛋白
試劑
純化水、無水乙醇
測試
過程
1. 開機,調用方法:Refractive Index。
2. 用純化水(20℃)進行校驗,校驗通過。
3. 配置標準曲線:免疫求蛋白、人血白蛋白
4. 取一小滴樣品,直接放置在棱鏡上,設置溫度為20℃,等待溫度穩定后,按start 鍵進行測量。
5. 測量結束后,將樣品擦除,并用純化水和無水乙醇分別進行清洗棱鏡。
02 樣品測量結果
water check
2.1 免疫球蛋白標準曲線:
2.2 人血白蛋白標準曲線:
2.3 將標準曲線數據用“用戶自定義公式”編輯功
能,保存至儀器內。
調用用戶自定義方法圖片
樣品測量過程圖片
03 結論
折光法簡單,準確,快速,可用于蛋白生產制備的中間品和終產品的蛋白含量指控,以指導生產及濃縮,提純等過程。
Abbemat 折光儀可實現 快速無損的折光率和濃度測量。所有高性能和模塊化系列折光儀在用戶級別、追蹤溯源和數據輸出防篡改等方面都符合 21 CFR Part 11 的有關規定。Abbemat T-Check 能夠精確校準所有安東帕折光儀的測量棱鏡的表面溫度。
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