答疑解惑丨細菌內毒素檢測常見問題解答第三彈:試劑選擇與保存指南!
在前兩期中,我們分別探討了細菌內毒素檢測中的常見問題以及檢測儀器的選擇與操作細節,為細菌內毒素檢測工作提供了全面的指導。然而,細菌內毒素檢測領域的復雜性遠不止于此,試劑的選擇、保存條件及其與檢測方法的匹配同樣對檢測結果的準確性產生深遠影響。
本期,我們將聚焦于細菌內毒素試劑的相關問題,旨在幫助相關從業者更加深入地理解試劑在細菌內毒素檢測中的關鍵作用,進一步提升檢測工作的精確性和效率。
一、細菌內毒素特異性試劑的定義
細菌內毒素特異性試劑是指一類專門設計用于僅與細菌內毒素發生反應的檢測試劑。與之相對,常規的鱟試劑除了能夠檢測細菌內毒素外,還可能與真菌細胞壁成分如(1→3)-β-D-葡聚糖發生交叉反應。
因此,細菌內毒素特異性試劑在檢測過程中提供了更高的準確性和特異性,避免了因非細菌內毒素成分引起的假陽性結果。
二、單次檢測與多次檢測的區別
(一)單次檢測:在這種檢測方式中,單次分量的鱟試劑已預先被添加到反應試管中。檢測時,只需將一定體積的測試溶液加入試管,即可進行內毒素的檢測。這種方式簡化了操作步驟,適用于快速、高效的檢測需求。
(二)多次檢測:在多次檢測中,鱟試劑首先需要用細菌內毒素檢測用水進行溶解。然后,將溶解后的鱟試劑按一定等分量分配到反應試管或微孔板中,供后續多次檢測使用。這種方式雖然操作相對復雜,但能夠靈活應對大量樣本的檢測需求,且降低了試劑的浪費。
三、試劑的保存條件與期限
為了確保試劑的有效性和準確性,所有試劑都應冷藏保存。具體保存條件和期限如下:
??Pyrotell® MTV(凝膠法鱟試劑):應保存在-20℃至8℃之間,直至產品有效期結束。
??Pyrotell® STV(凝膠法鱟試劑):同樣應保存在-20℃至8℃之間,直至產品有效期結束。
??Pyrosate®(凝膠法內毒素快速檢測試劑):可在2℃至25℃之間保存,直至產品有效期。
??Pyrotell®-T(濁度法鱟試劑):應保存在-20℃至8℃之間,并在復溶后于2-8℃下保存24小時,或-20℃下凍存3個月(只能凍融一次)。
??Pyrochrome®(顯色法鱟試劑):應保存在-20℃至8℃之間,并在復溶后于2-8℃下保存8小時(不能凍存)。
??PyroSmart NextGen® (重組鱟試劑):鱟試劑和復溶緩沖液應儲存于2-8℃環境中。使用前需恢復室溫至少30分鐘,并在復溶后室溫放置,于3-20分鐘內使用。
??細菌內毒素工作標準品(CSE):0.5μg/vial的CSE(E0005)應在2-8℃下保存,并在復溶后不超過4周內使用(不能凍存)。系列稀釋前需至少渦旋30秒。125μg/vial的CSE(E0125)同樣應在2-8℃下保存,并在復溶后不超過3個月內使用(不能凍存)。系列稀釋前也需至少渦旋30秒。
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