枸杞多糖是從枸杞子中提取出來的一種水溶性的多糖,主要成分包括甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。枸杞多糖可以用于食物添加劑,飲料營養補充劑,和化妝品的原料等。
根據GB/T 44739-2024,枸杞及其制品中枸杞多糖的測定方法是:離子色譜法。其原理是:樣品經乙醇除雜、水回流提取得到枸杞多糖后,用
C?HF?O?消解,產物經陰離子色譜柱分離,經離子色譜儀測定,外標法定量,以各單糖峰面積為基準計算出樣品中枸杞多糖含量。
實驗涉及標準曲線的繪制:
單糖標準儲備溶液:分別準確稱取100、210、150、60、140、30、510mg和30mg(精確至0.1mg)半乳糖(純度≧98%)、阿拉伯糖(純度≧98%)、葡萄糖(純度≧98%)、鼠李糖(純度≧98%)、木糖(純度≧98%)、甘露糖(純度≧98%)、半乳糖醛酸(純度≧98%)和葡萄糖醛酸標準品置于50mL燒杯中,用水溶解并轉移至100mL容量瓶,用水定容至刻度,混勻,4℃避光保存。葡萄糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸標準儲備溶液有效期為2個月,其他單準儲備液有效期為6月。
混合單糖標準中間溶液:用Miragen電動移液器準確吸取10mL各單糖標準儲備溶液,加入100mL容量瓶中,用水稀釋至刻度,混勻,4℃避光保存,有效期為1個月。
混合單唐標準系列T作溶液:采用50mL規格的赫施曼opus電子瓶口分配器,設置stepper模式,設置兩組分液體積,第1組:0、1、5、10、15mL,第2組:20、25mL,將兩組體積的混合單標準中間溶液分別加入到500mL容量瓶中,用水定容至刻度,混勻配制成不同反量濃度的混合單糖標準系列工作溶夜,見附錄A中表A.1。
將反相爭化小柱(C18填料)依次用5mL甲醇、10mL水活化,放30min后使用。用Miragen電動移液器吸取4mL混合單糖標準系列工作溶液過0.22μm尼龍水系膜后,加載至相凈化小柱(C18填料),去前2~3mL流出液,收集續濾,待測。按照設定的色譜條件,待器穩定后,依次測定混合單糖標準系列工作溶液為色譜峰面積。以各單糖后量濃度為橫標,以峰面為縱坐標繪制標準曲線混合單唐標準工作溶液色譜圖見附錄B中圖B1。
實驗室移取小體積(幾微升到10毫升)的液體,一般采用移液器。Miragen電動移液器,數值靠設定或選定,電機控制活塞運動,吸液和排液也更加穩定,還有步驟少、調數快、模式多等諸多優勢。
赫施曼的opus電子瓶口分配器分辨率可達微升,不僅可用于常規的等體積分液,一次裝液還可完成10個不同體積的連續分液,可用于毫升級的母液添加和分液,大體積的型號可代替燒杯、玻璃棒、洗瓶,用于稀釋液的快速、準確地添加,非常適合做標準曲線和毫升級大批量灌裝。
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