高效液相色譜儀的分離原理主要取決于流動(dòng)相和固定相的吸附和解吸附。流動(dòng)相的正確配置對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和分離效果至關(guān)重要，它會(huì)直接影響樣品中組分的保留和轉(zhuǎn)移，從而對(duì)樣品的分離產(chǎn)生影響。因此，正確選擇和配置流動(dòng)相是非常重要的。本期我們就來介紹一些流動(dòng)相制備方面的技巧，以幫助大家獲得更優(yōu)異的分離效果和更準(zhǔn)確的分析結(jié)果。

使用簡單的流動(dòng)相

在HPLC分析中選擇簡單的流動(dòng)相可以使方法更穩(wěn)定且易于轉(zhuǎn)移，同時(shí)在使用的過程中減少故障發(fā)生和停機(jī)。

基于重量比制備流動(dòng)相

在流動(dòng)相制備過程中，如果根據(jù)體積比(V/V)進(jìn)行溶劑的混合，溶液體積可能會(huì)隨溫度的變化而變化，從而影響分離的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。因此最好根據(jù)重量比制備流動(dòng)相，這樣即使環(huán)境條件發(fā)生變化，重量比也會(huì)保持一致。

對(duì)流動(dòng)相組分分別混合

當(dāng)我們根據(jù)體積比制備流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)該先按照相應(yīng)比例分別計(jì)算流動(dòng)相中各溶劑的體積，然后進(jìn)行混合。通常有兩種混合方式，如果先加入水，再加有機(jī)溶劑，混合溶劑的收縮會(huì)增加其濃度。如果先加入有機(jī)溶劑，再加入水，混合溶劑的收縮會(huì)降低其濃度。

使用預(yù)混合的流動(dòng)相

使用預(yù)混合的流動(dòng)相，這在反相色譜中比較常用，這種方式有助于避免混合過程中的溫度變化，提高混合效率，使其更有效地脫氣。

溶劑溫度校正

基于體積比制備流動(dòng)相時(shí)，首先須將溶劑置于室溫條件下，確保體積的一致性和分析的重現(xiàn)性。這種可以通過將溶劑放入熱水或冷水浴中以調(diào)整溶劑溫度。

選擇正確的過濾裝置

在制備過程中過濾流動(dòng)相時(shí)，選擇正確的過濾裝置是非常重要的。對(duì)于HPLC系統(tǒng)，建議使用孔徑為0.45µm或孔徑更小的濾膜；而對(duì)于UHPLC系統(tǒng)，濾膜孔徑應(yīng)小于等于0.22µm，這樣可以有效地去除流動(dòng)相中的顆粒，防止系統(tǒng)堵塞。

推薦產(chǎn)品：

總而言之，選擇合適的制備流動(dòng)相的溶劑與方式，才能確保良好的分離度和分析的重現(xiàn)性，為色譜工作者保駕護(hù)航。