PBS作為生物實(shí)驗(yàn)中試劑,PBS是磷酸緩沖鹽溶液,一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。它具有鹽平衡、可調(diào)整適宜pH、可以緩沖pH等特點(diǎn)。
PBS、蒸餾水和生理鹽水三種溶劑該怎么選擇呢?
蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;而生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng)。
在實(shí)驗(yàn)室也常見PB、PBST溶液。PB溶液的成分通常有磷酸鈉和磷酸鉀。若只是化學(xué)反應(yīng),用PB溶液就行。在PB的基礎(chǔ)上按照一定比例加NaCl,就可配置PBS;將磷酸鈉和磷酸鉀,NaCl,Tween-20按照一定比例,即可配成PBST溶液。
PBS配置過程
第一步,準(zhǔn)備洗干凈的瓶子和配置PBS所需的純水。
第二步,根據(jù)所需要的PBS濃度確定各成分需要的量,不同實(shí)驗(yàn)室要求不一樣,所以成分及用量會(huì)有區(qū)別。
第三步,將稱取的藥品加入純水?dāng)嚢柚寥芙狻?/p>
第四步,將溶液pH調(diào)整至7.4左右。這里不同實(shí)驗(yàn)對(duì)溶液pH要求不一樣,細(xì)胞部門主要是用于胰酶消化細(xì)胞,胰酶在偏堿性環(huán)境活性會(huì)強(qiáng)一點(diǎn),所以細(xì)胞部門的pH可以稍微偏高一點(diǎn),一般實(shí)驗(yàn)使用的話調(diào)整pH 7.2-7.4即可。
第五步,將配好的溶液定容到所需的體積,然后高溫高壓滅菌或者0.22um濾膜過濾除菌。時(shí)間充足的可以高溫高壓滅菌,比較著急用的可以直接0.22um濾膜過濾。
第六步,等滅菌的PBS溫度降下來或者過濾了就是無(wú)菌的PBS了,擰緊瓶蓋,封上封口膜,就可以放在4度冰箱備用了。
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